Nun proxecto anterior que probaba plantas locais de procesamento de alimentos para mosquitos en Tailandia, descubriuse que os aceites esenciais (EO) de Cyperus rotundus, galangal e canela tiñan unha boa actividade antimosquitos contra Aedes aegypti.Nun intento de reducir o uso do tradicionalinsecticidase mellorar o control das poboacións de mosquitos resistentes, este estudo tivo como obxectivo identificar a posible sinerxía entre os efectos adulticidas do óxido de etileno e a toxicidade da permetrina para os mosquitos Aedes.aegypti, incluíndo cepas sensibles e resistentes aos piretroides.
Avaliar a composición química e a actividade de destrucción do OE extraído dos rizomas de C. rotundus e A. galanga e da casca de C. verum fronte á cepa susceptible Muang Chiang Mai (MCM-S) e a cepa resistente Pang Mai Dang (PMD-R). ).) Adulto activo Ae.Aedes aegypti.Tamén se realizou un bioensaio para adultos da mestura EO-permetrina nestes mosquitos Aedes para comprender a súa actividade sinérxica.cepas aegypti.
A caracterización química mediante o método analítico GC-MS mostrou que se identificaron 48 compostos a partir dos EO de C. rotundus, A. galanga e C. verum, representando o 80,22%, 86,75% e 97,24% dos compoñentes totais, respectivamente.O cipereno (14,04%), o β-bisaboleno (18,27%) e o cinamaldehido (64,66%) son os principais compoñentes do aceite de cyperus, o aceite de galangal e o aceite balsámico, respectivamente.Nos ensaios biolóxicos de matanza de adultos, os EV de C. rotundus, A. galanga e C. verum foron eficaces para matar Ae.aegypti, MCM-S e PMD-R LD50 foron 10,05 e 9,57 μg/mg femia, 7,97 e 7,94 μg/mg femia e 3,30 e 3,22 μg/mg femia, respectivamente.Eficiencia de MCM-S e PMD-R Ae na matanza de adultos.aegypti nestes EO estaba preto do butóxido de piperonilo (valores de PBO, DL50 = 6,30 e 4,79 μg/mg femia, respectivamente), pero non tan pronunciado como a permetrina (valores DL50 = 0,44 e 3,70 ng/mg femia, respectivamente).Non obstante, os bioensaios combinados atoparon sinerxía entre EO e permetrina.Sinerxismo significativo coa permetrina contra dúas cepas de mosquitos Aedes.Aedes aegypti notouse no EM de C. rotundus e A. galanga.A adición de aceites de C. rotundus e A. galanga reduciu significativamente os valores de LD50 da permetrina en MCM-S de 0,44 a 0,07 ng/mg e 0,11 ng/mg nas femias, respectivamente, con valores de ratio de sinerxía (SR). de 6,28 e 4,00 respectivamente.Ademais, C. rotundus e A. galanga EO tamén reduciron significativamente os valores de LD50 da permetrina en PMD-R de 3,70 a 0,42 ng/mg e 0,003 ng/mg nas femias, respectivamente, con valores de SR de 8,81 e 1233,33, respectivamente..
Efecto sinérxico dunha combinación de EO-permetrina para mellorar a toxicidade dos adultos contra dúas cepas de mosquitos Aedes.Aedes aegypti demostra un papel prometedor para o óxido de etileno como sinerxista para mellorar a eficacia contra os mosquitos, especialmente cando os compostos tradicionais son ineficaces ou inadecuados.
O mosquito Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) é o principal vector da febre do dengue e doutras enfermidades virais infecciosas como a febre amarela, o chikungunya e o virus Zika, que representan unha ameaza enorme e persistente para os humanos[1, 2]..O virus do dengue é a febre hemorráxica patóxena máis grave que afecta aos humanos, cun estimado de 5-100 millóns de casos anualmente e máis de 2.500 millóns de persoas en todo o mundo en risco [3].Os brotes desta enfermidade infecciosa supoñen unha enorme carga para as poboacións, os sistemas de saúde e as economías da maioría dos países tropicais [1].Segundo o Ministerio de Sanidade de Tailandia, en 2015 rexistráronse 142.925 casos de dengue e 141 mortes en todo o país, máis de tres veces o número de casos e mortes en 2014 [4].A pesar das evidencias históricas, o mosquito Aedes erradicouse ou reduciuse moito a febre do dengue.Tras o control de Aedes aegypti [5], as taxas de infección aumentaron drasticamente e a enfermidade estendeuse por todo o mundo, debido en parte a décadas de quecemento global.Eliminación e control de Ae.Aedes aegypti é relativamente difícil porque é un mosquito vector doméstico que se aparea, alimenta, repousa e pon ovos dentro e arredor da habitación humana durante o día.Ademais, este mosquito ten a capacidade de adaptarse aos cambios ambientais ou perturbacións causadas por eventos naturais (como a seca) ou as medidas de control humano, e pode volver ao seu número orixinal [6, 7].Dado que as vacinas contra a febre do dengue só se aprobaron recentemente e non existe un tratamento específico para a febre do dengue, previr e reducir o risco de transmisión do dengue depende enteiramente do control dos mosquitos vectores e da eliminación do contacto humano cos vectores.
En particular, o uso de produtos químicos para o control dos mosquitos agora xoga un papel importante na saúde pública como un compoñente importante da xestión integral integrada de vectores.Os métodos químicos máis populares inclúen o uso de insecticidas pouco tóxicos que actúan contra as larvas de mosquitos (larvicidas) e os mosquitos adultos (adicidas).Considérase importante o control das larvas mediante a redución da fonte e o uso regular de larvicidas químicos como os organofosforados e os reguladores do crecemento de insectos.Non obstante, os impactos ambientais adversos asociados cos pesticidas sintéticos e o seu mantemento complexo e intensivo en man de obra seguen sendo unha gran preocupación [8, 9].O control activo tradicional de vectores, como o control de adultos, segue sendo o medio máis eficaz de control durante os brotes virais porque pode erradicar os vectores de enfermidades infecciosas de forma rápida e a gran escala, así como reducir a vida útil e a lonxevidade das poboacións locais de vectores [3]., 10].Catro clases de insecticidas químicos: os organoclorados (referidos só como DDT), os organofosforados, os carbamatos e os piretroides forman a base dos programas de control de vectores, sendo os piretroides considerados a clase máis exitosa.Son moi eficaces contra varios artrópodos e teñen unha eficacia baixa.toxicidade para os mamíferos.Actualmente, os piretroides sintéticos constitúen a maioría dos pesticidas comerciais, representando preto do 25% do mercado mundial de pesticidas [11, 12].A permitrina e a deltametrina son insecticidas piretroides de amplo espectro que se utilizaron en todo o mundo durante décadas para controlar unha variedade de pragas de importancia agrícola e médica [13, 14].Na década de 1950, o DDT foi seleccionado como o produto químico de elección para o programa nacional de control de mosquitos de saúde pública de Tailandia.Tras o uso xeneralizado do DDT nas zonas endémicas da malaria, Tailandia eliminou gradualmente o uso do DDT entre 1995 e 2000 e substituíuno por dous piretroides: permetrina e deltametrina [15, 16].Estes insecticidas piretroides introducíronse a principios da década de 1990 para controlar a malaria e a febre do dengue, principalmente mediante tratamentos de redeiras e o uso de néboas térmicas e sprays de toxicidade ultra baixa [14, 17].Non obstante, perderon eficacia debido á forte resistencia dos mosquitos e á falta de cumprimento público debido ás preocupacións sobre a saúde pública e o impacto ambiental dos produtos químicos sintéticos.Isto supón importantes retos para o éxito dos programas de control de vectores de ameazas [14, 18, 19].Para facer a estratexia máis eficaz son necesarias contramedidas oportunas e adecuadas.Os procedementos de xestión recomendados inclúen a substitución de substancias naturais, a rotación de produtos químicos de diferentes clases, a adición de sinerxistas e a mestura de produtos químicos ou a aplicación simultánea de produtos químicos de diferentes clases [14, 20, 21].Polo tanto, urxe buscar e desenvolver unha alternativa e sinerxista ecolóxica, cómoda e eficaz e este estudo pretende abordar esta necesidade.
Os insecticidas de orixe natural, especialmente os baseados en compoñentes vexetais, mostraron potencial na avaliación das alternativas actuais e futuras de control de mosquitos [22, 23, 24].Varios estudos demostraron que é posible controlar importantes mosquitos vectores empregando produtos vexetais, especialmente aceites esenciais (EO), como asasinas para adultos.Atopáronse propiedades adulticidas contra algunhas especies importantes de mosquitos en moitos aceites vexetais como apio, comiño, zedoaria, anís, pementa pipa, tomiño, Schinus terebinthifolia, Cymbopogon citratus, Cymbopogon schoenanthus, Cymbopogon giganteus, Chenopodium ambrosioides, Cochlospermuca etcornlyptuchonis. ., Eucalyptus citriodora, Cananga odorata e Petroselinum Criscum [25,26,27,28,29,30].O óxido de etileno úsase agora non só por si mesmo, senón tamén en combinación con substancias vexetais extraídas ou pesticidas sintéticos existentes, producindo diversos graos de toxicidade.As combinacións de insecticidas tradicionais como organofosfatos, carbamatos e piretroides con óxido de etileno/extractos vexetais actúan de forma sinérxica ou antagónica nos seus efectos tóxicos e demostraron ser eficaces contra vectores de enfermidades e pragas [31,32,33,34,35].Non obstante, a maioría dos estudos sobre os efectos tóxicos sinérxicos das combinacións de fitoquímicos con ou sen produtos químicos sintéticos realizáronse sobre insectos vectores e pragas agrícolas en lugar de sobre mosquitos de importancia médica.Ademais, a maior parte do traballo sobre os efectos sinérxicos das combinacións de insecticidas sintéticos de plantas contra os mosquitos vectores centrouse no efecto larvicida.
Nun estudo previo realizado polos autores como parte dun proxecto de investigación en curso que analiza intimicidas de plantas alimentarias autóctonas en Tailandia, descubriuse que os óxidos de etileno de Cyperus rotundus, galanga e canela tiñan actividade potencial contra Aedes adultos.Exipto [36].Polo tanto, este estudo tivo como obxectivo avaliar a eficacia dos EO illados destas plantas medicinais fronte aos mosquitos Aedes.aegypti, incluíndo cepas sensibles e resistentes aos piretroides.Tamén se analizou o efecto sinérxico de mesturas binarias de óxido de etileno e piretroides sintéticos con boa eficacia en adultos para reducir o uso de insecticidas tradicionais e aumentar a resistencia aos mosquitos vectores, especialmente fronte a Aedes.Aedes aegypti.Este artigo informa da caracterización química dos aceites esenciais eficaces e do seu potencial para mellorar a toxicidade da permetrina sintética contra os mosquitos Aedes.aegypti en cepas sensibles a piretroides (MCM-S) e cepas resistentes (PMD-R).
Os rizomas de C. rotundus e A. galanga e a casca de C. verum (Fig. 1) utilizados para a extracción de aceites esenciais foron adquiridos a provedores de fitoterapia na provincia de Chiang Mai, Tailandia.A identificación científica destas plantas conseguiuse mediante a consulta co Sr. James Franklin Maxwell, botánico de herbario, Departamento de Bioloxía, Facultade de Ciencias da Universidade de Chiang Mai (CMU), provincia de Chiang Mai, Tailandia, e o científico Wannari Charoensap;no Departamento de Farmacia da Facultade de Farmacia da Universidade Carnegie Mellon, os exemplares de vales de cada planta almacénanse no Departamento de Parasitoloxía da Facultade de Medicina da Universidade Carnegie Mellon para o seu uso futuro.
As mostras de plantas secáronse individualmente á sombra durante 3-5 días nun espazo aberto con ventilación activa e unha temperatura ambiente de aproximadamente 30 ± 5 °C para eliminar o contido de humidade antes da extracción dos aceites esenciais naturais (EO).Un total de 250 g de cada material vexetal seco moídouse mecánicamente nun po groso e utilizouse para illar aceites esenciais (EO) mediante destilación a vapor.O aparello de destilación consistía nun manto de calefacción eléctrico, un matraz de fondo redondo de 3000 ml, unha columna de extracción, un condensador e un dispositivo Cool Ace (Eyela Cool Ace CA-1112 CE, Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Tokio, Xapón) .Engade 1600 ml de auga destilada e 10-15 perlas de vidro ao matraz e despois quéntao ata aproximadamente 100 °C usando un quentador eléctrico durante polo menos 3 horas ata que se complete a destilación e non se produza máis EO.A capa de EO separouse da fase acuosa mediante un funil separador, secouse sobre sulfato de sodio anhidro (Na2SO4) e almacenouse nunha botella marrón pechada a 4 °C ata que se examinou a composición química e a actividade dos adultos.
A composición química dos aceites esenciais realizouse simultaneamente co bioensaio para a substancia adulta.A análise cualitativa realizouse mediante un sistema GC-MS formado por un cromatógrafo de gases Hewlett-Packard (Wilmington, CA, EUA) 7890A equipado cun detector selectivo de masa único cuadrupolo (Agilent Technologies, Wilmington, CA, EUA) e un MSD 5975C (EI). ).(Agilent Technologies).
Columna cromatográfica – DB-5MS (30 m × ID 0,25 mm × espesor da película 0,25 µm).O tempo total de execución de GC-MS foi de 20 minutos.As condicións de análise son que as temperaturas do inxector e da liña de transferencia sexan de 250 e 280 °C, respectivamente;a temperatura do forno está configurada para aumentar de 50 °C a 250 °C a unha velocidade de 10 °C/min, o gas portador é helio;caudal 1,0 ml/min;o volume de inxección é de 0,2 µL (1/10% en volume en CH2Cl2, proporción de división 100:1);Para a detección por GC-MS úsase un sistema de ionización electrónica cunha enerxía de ionización de 70 eV.O rango de adquisición é de 50–550 unidades de masa atómica (amu) e a velocidade de exploración é de 2,91 exploracións por segundo.As porcentaxes relativas dos compoñentes exprésanse como porcentaxes normalizadas por área de pico.A identificación dos ingredientes EO baséase no seu índice de retención (RI).O RI calculouse mediante a ecuación de Van den Dool e Kratz [37] para a serie de n-alcanos (C8-C40) e comparouse cos índices de retención da literatura [38] e das bases de datos da biblioteca (NIST 2008 e Wiley 8NO8).A identidade dos compostos mostrados, como a estrutura e a fórmula molecular, confirmouse mediante a comparación con mostras auténticas dispoñibles.
Os estándares analíticos para permetrina sintética e butóxido de piperonilo (PBO, control positivo en estudos de sinerxia) foron adquiridos de Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, EUA).Os kits de proba para adultos da Organización Mundial da Saúde (OMS) e as doses diagnósticas de papel impregnado de permetrina (0,75 %) foron adquiridos comercialmente no Centro de Control de Vectores da OMS en Penang, Malaisia.Todos os outros produtos químicos e reactivos utilizados eran de calidade analítica e foron adquiridos en institucións locais da provincia de Chiang Mai, Tailandia.
Os mosquitos utilizados como organismos de proba no bioensaio de adultos eran mosquitos Aedes de laboratorio que se apareaban libremente.aegypti, incluíndo a cepa susceptible de Muang Chiang Mai (MCM-S) e a cepa resistente de Pang Mai Dang (PMD-R).A cepa MCM-S obtívose a partir de mostras locais recollidas na zona de Muang Chiang Mai, provincia de Chiang Mai, Tailandia, e mantívose na sala de entomoloxía do Departamento de Parasitoloxía da Facultade de Medicina da CMU, desde 1995 [39].A cepa PMD-R, que se descubriu que era resistente á permetrina, foi illada de mosquitos de campo orixinariamente recollidos de Ban Pang Mai Dang, distrito de Mae Tang, provincia de Chiang Mai, Tailandia, e mantívose no mesmo instituto desde 1997 [40]. ].As cepas de PMD-R cultiváronse baixo presión selectiva para manter os niveis de resistencia mediante a exposición intermitente a permetrina ao 0,75% usando o kit de detección da OMS con algunhas modificacións [41].Cada cepa de Ae.Aedes aegypti foi colonizado individualmente nun laboratorio libre de patóxenos a 25 ± 2 °C e 80 ± 10% de humidade relativa e un fotoperíodo claro/escuro de 14:10 h.Aproximadamente 200 larvas mantivéronse en bandexas de plástico (33 cm de longo, 28 cm de ancho e 9 cm de alto) cheas de auga da billa cunha densidade de 150-200 larvas por bandexa e alimentáronse dúas veces ao día con galletas esterilizadas para cans.Os vermes adultos mantivéronse en gaiolas húmidas e alimentáronse continuamente cunha solución acuosa de sacarosa ao 10% e unha solución de xarope multivitamínico ao 10%.As femias de mosquitos chupan regularmente sangue para poñer ovos.As femias de dous a cinco días que non foron alimentadas con sangue pódense utilizar continuamente en probas biolóxicas experimentais para adultos.
Realizouse un bioensaio de resposta dose-mortalidade de EO en mosquitos Aedes femias adultas.aegypti, MCM-S e PMD-R utilizando un método tópico modificado segundo o protocolo estándar da OMS para probas de susceptibilidade [42].O EO de cada planta foi diluído en serie cun disolvente axeitado (por exemplo, etanol ou acetona) para obter unha serie graduada de 4-6 concentracións.Despois da anestesia con dióxido de carbono (CO2), os mosquitos pesáronse individualmente.A continuación, os mosquitos anestesiados mantivéronse inmóbiles sobre papel de filtro seco nunha placa fría personalizada baixo un microscopio estereoscópico para evitar a reactivación durante o procedemento.Para cada tratamento, aplicáronse 0,1 μl de solución de EO ao pronoto superior da femia mediante un microdispensador portátil Hamilton (700 Series Microliter™, Hamilton Company, Reno, NV, EUA).Vinte e cinco femias foron tratadas con cada concentración, cunha mortalidade que oscila entre o 10% e o 95% para polo menos 4 concentracións diferentes.Os mosquitos tratados con disolvente servían de control.Para evitar a contaminación das mostras de proba, substitúa o papel de filtro por un novo papel de filtro para cada EO probado.As doses utilizadas nestes bioensaios exprésanse en microgramos de EO por miligramo de peso corporal da muller viva.A actividade de PBO de adultos tamén se avaliou de forma similar á EO, sendo a PBO utilizada como control positivo en experimentos sinérxicos.Os mosquitos tratados en todos os grupos colocáronse en vasos de plástico e déronlles un 10% de sacarosa máis un 10% de xarope multivitamínico.Todos os bioensaios realizáronse a 25 ± 2 °C e 80 ± 10% de humidade relativa e repítense catro veces cos controis.A mortalidade durante o período de cría de 24 horas comprobouse e confirmouse pola falta de resposta do mosquito á estimulación mecánica e despois rexistrouse en base á media de catro réplicas.Os tratamentos experimentais repitéronse catro veces para cada mostra de proba utilizando diferentes lotes de mosquitos.Os resultados foron resumidos e utilizados para calcular a taxa de mortalidade porcentual, que se utilizou para determinar a dose letal de 24 horas mediante análise probit.
O efecto anticida sinérxico de EO e permetrina avaliouse mediante un procedemento de ensaio de toxicidade local [42] como se describiu anteriormente.Use acetona ou etanol como disolvente para preparar permetrina na concentración desexada, así como unha mestura binaria de EO e permetrina (EO-permetrina: permetrina mesturada con EO a concentración LD25).Os kits de proba (permetrina e EO-permetrina) avaliáronse contra as cepas de Ae MCM-S e PMD-R.Aedes aegypti.Cada unha das 25 femias de mosquitos recibiu catro doses de permetrina para probar a súa eficacia na matanza de adultos, e cada tratamento repetiuse catro veces.Para identificar candidatos sinerxistas de EO, administráronse de 4 a 6 doses de EO-permetrina a cada unha das 25 femias de mosquitos, repetindo cada aplicación catro veces.O tratamento con PBO-permetrina (permetrina mesturada con concentración LD25 de PBO) tamén serviu como control positivo.As doses utilizadas nestes bioensaios exprésanse en nanogramos de mostra de proba por miligramo de peso corporal das mulleres vivas.Realizáronse catro avaliacións experimentais para cada cepa de mosquitos en lotes criados individualmente, e os datos de mortalidade foron agrupados e analizados usando Probit para determinar unha dose letal de 24 horas.
A taxa de mortalidade axustouse mediante a fórmula de Abbott [43].Os datos axustados foron analizados mediante a análise de regresión Probit utilizando o programa de estatística informática SPSS (versión 19.0).Os valores letais do 25%, 50%, 90%, 95% e 99% (LD25, LD50, LD90, LD95 e LD99, respectivamente) calculáronse utilizando os correspondentes intervalos de confianza do 95% (IC 95%).As medicións de significación e diferenzas entre mostras de proba avaliáronse mediante a proba de chi cadrado ou a proba U de Mann-Whitney dentro de cada ensaio biolóxico.Os resultados consideráronse estatisticamente significativos en P< 0,05.O coeficiente de resistencia (RR) estímase no nivel LD50 mediante a seguinte fórmula [12]:
RR > 1 indica resistencia e RR ≤ 1 indica sensibilidade.O valor da relación de sinerxía (SR) de cada candidato sinerxista calcúlase do seguinte xeito [34, 35, 44]:
Este factor divide os resultados en tres categorías: un valor SR de 1±0,05 considérase que non ten efecto aparente, un valor SR de >1,05 considérase que ten un efecto sinérxico e un valor SR de A aceite líquido amarelo claro pódese obtido por destilación ao vapor dos rizomas de C. rotundus e A. galanga e da cortiza de C. verum.Os rendementos calculados en peso seco foron 0,15%, 0,27% (p/p) e 0,54% (v/v).w) respectivamente (táboa 1).O estudo GC-MS da composición química dos aceites de C. rotundus, A. galanga e C. verum mostrou a presenza de 19, 17 e 21 compostos, que representaron o 80,22, 86,75 e 97,24% de todos os compoñentes, respectivamente (táboa 2). ).Os compostos de aceite de rizoma de C. lucidum consisten principalmente en ciperoneno (14,04%), seguido de carraleno (9,57%), α-capsellan (7,97%) e α-capsellan (7,53%).O principal compoñente químico do aceite de rizoma de galanga é o β-bisaboleno (18,27%), seguido do α-bergamoteno (16,28%), o 1,8-cineol (10,17%) e o piperonol (10,09%).Mentres que o cinamaldehido (64,66%) identificouse como o compoñente principal do aceite de casca de C. verum, o acetato cinámico (6,61%), o α-copeno (5,83%) e o 3-fenilpropionaldehido (4,09%) foron considerados ingredientes menores.As estruturas químicas do ciperno, o β-bisaboleno e o cinamaldehído son os principais compostos de C. rotundus, A. galanga e C. verum, respectivamente, como se mostra na Figura 2.
Os resultados de tres OO avaliaron a actividade dos adultos contra os mosquitos Aedes.os mosquitos aegypti móstranse na Táboa 3. Descubriuse que todos os EO tiñan efectos letais sobre os mosquitos MCM-S Aedes en diferentes tipos e doses.Aedes aegypti.O EO máis eficaz é C. verum, seguido de A. galanga e C. rotundus con valores de DL50 de 3,30, 7,97 e 10,05 μg/mg MCM-S femias respectivamente, lixeiramente superiores a 3,22 (U = 1), Z = -0,775, P = 0,667), 7,94 (U = 2, Z = 0, P = 1) e 9,57 (U = 0, Z = -1,549, P = 0,333) μg/mg PMD -R en mulleres.Isto corresponde a que a PBO teña un efecto adulto lixeiramente maior sobre a PMD-R que a cepa MSM-S, con valores de DL50 de 4,79 e 6,30 μg/mg en femias, respectivamente (U = 0, Z = -2,021, P = 0,057) .).Pódese calcular que os valores de LD50 de C. verum, A. galanga, C. rotundus e PBO fronte a PMD-R son aproximadamente 0,98, 0,99, 0,95 e 0,76 veces inferiores aos de MCM-S, respectivamente.Así, isto indica que a susceptibilidade a PBO e EO é relativamente similar entre as dúas cepas de Aedes.Aínda que PMD-R era máis susceptible que MCM-S, a sensibilidade de Aedes aegypti non foi significativa.Pola contra, as dúas cepas de Aedes diferían moito na súa sensibilidade á permetrina.aegypti (táboa 4).PMD-R demostrou unha resistencia significativa á permetrina (valor DL50 = 0,44 ng/mg en mulleres) cun valor LD50 máis alto de 3,70 en comparación co MCM-S (valor DL50 = 0,44 ng/mg en mulleres) ng/mg en mulleres (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029).Aínda que a PMD-R é moito menos sensible á permetrina que a MCM-S, a súa sensibilidade aos aceites de PBO e C. verum, A. galanga e C. rotundus é lixeiramente superior á MCM-S.
Tal e como se observou no bioensaio de poboación adulta da combinación EO-permetrina, as mesturas binarias de permetrina e EO (LD25) mostraron sinerxía (valor SR > 1,05) ou ningún efecto (valor SR = 1 ± 0,05).Efectos complexos adultos dunha mestura de EO-permetrina en mosquitos albinos experimentais.As cepas de Aedes aegypti MCM-S e PMD-R móstranse na táboa 4 e na figura 3. A adición de aceite de C. verum reduce lixeiramente a LD50 de permetrina fronte a MCM-S e aumenta lixeiramente a LD50 fronte a PMD-R ata 0,44– 0,42 ng/mg en mulleres e de 3,70 a 3,85 ng/mg en mulleres, respectivamente.Pola contra, a adición de aceites de C. rotundus e A. galanga reduciu significativamente a LD50 da permetrina en MCM-S de 0,44 a 0,07 (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) e a 0,11 (U = 0)., Z) = -2,309, P = 0,029) ng/mg mulleres.Con base nos valores LD50 de MCM-S, os valores SR da mestura de EO-permetrina despois da adición de aceites de C. rotundus e A. galanga foron 6,28 e 4,00, respectivamente.En consecuencia, a LD50 de permetrina fronte a PMD-R diminuíu significativamente de 3,70 a 0,42 (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) e a 0,003 coa adición de aceites de C. rotundus e A. galanga (U = 0) ., Z = -2,337, P = 0,029) ng/mg femia.O valor SR da permetrina combinada con C. rotundus fronte a PMD-R foi de 8,81, mentres que o valor SR da mestura de galanga-permetrina foi de 1233,33.En relación ao MCM-S, o valor LD50 do control positivo PBO diminuíu de 0,44 a 0,26 ng/mg (femias) e de 3,70 ng/mg (femias) a 0,65 ng/mg (U = 0, Z = -2,309, P). = 0,029) e PMD-R (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029).Os valores SR da mestura PBO-permetrina para as cepas MCM-S e PMD-R foron 1,69 e 5,69, respectivamente.Estes resultados indican que os aceites de C. rotundus e A. galanga e PBO melloran a toxicidade da permetrina en maior medida que o aceite de C. verum para as cepas MCM-S e PMD-R.
Actividade adulta (DL50) de EO, PBO, permetrina (PE) e as súas combinacións contra cepas sensibles aos piretroides (MCM-S) e resistentes (PMD-R) de mosquitos Aedes.Aedes aegypti
[45].Os piretroides sintéticos úsanse en todo o mundo para controlar case todos os artrópodos de importancia agrícola e médica.Non obstante, debido ás consecuencias nocivas do uso de insecticidas sintéticos, especialmente no que se refire ao desenvolvemento e á resistencia xeneralizada dos mosquitos, así como ao impacto sobre a saúde e o medio ambiente a longo prazo, agora existe unha necesidade urxente de reducir o uso. de insecticidas sintéticos tradicionais e desenvolver alternativas [35, 46, 47].Ademais de protexer o medio ambiente e a saúde humana, as vantaxes dos insecticidas botánicos inclúen a alta selectividade, a dispoñibilidade global e a facilidade de produción e uso, o que os fai máis atractivos para o control dos mosquitos [32,48,49].Este estudo, ademais de dilucidar as características químicas dos aceites esenciais efectivos mediante a análise GC-MS, tamén avaliou a potencia dos aceites esenciais para adultos e a súa capacidade para mellorar a toxicidade da permetrina sintética.aegypti en cepas sensibles a piretroides (MCM-S) e cepas resistentes (PMD-R).
A caracterización por GC-MS mostrou que o ciperno (14,04%), o β-bisaboleno (18,27%) e o cinamaldehido (64,66%) eran os principais compoñentes dos aceites de C. rotundus, A. galanga e C. verum, respectivamente.Estes produtos químicos demostraron diversas actividades biolóxicas.Ahn et al.[50] informou de que o 6-acetoxicipereno, illado do rizoma de C. rotundus, actúa como un composto antitumoral e pode inducir a apoptose dependente da caspase nas células cancerosas de ovario.O β-bisaboleno, extraído do aceite esencial da árbore de mirra, presenta citotoxicidade específica contra as células tumorais mamarias humanas e de rato tanto in vitro como in vivo [51].O cinamaldehído, obtido a partir de extractos naturais ou sintetizado en laboratorio, ten actividades insecticidas, antibacterianas, antifúngicas, antiinflamatorias, inmunomoduladoras, anticanceríxenas e antianxioxénicas [52].
Os resultados do bioensaio de actividade dos adultos dependentes da dose mostraron un bo potencial dos EO probados e mostraron que as cepas de mosquitos Aedes MCM-S e PMD-R tiñan unha susceptibilidade similar a EO e PBO.Aedes aegypti.Unha comparación da eficacia de EO e permetrina mostrou que esta última ten un efecto alercida máis forte: os valores de LD50 son 0,44 e 3,70 ng/mg nas femias para as cepas MCM-S e PMD-R, respectivamente.Estes achados están apoiados por moitos estudos que mostran que os pesticidas naturais, especialmente os produtos derivados de plantas, son xeralmente menos efectivos que as substancias sintéticas [31, 34, 35, 53, 54].Isto pode deberse a que o primeiro é unha combinación complexa de ingredientes activos ou inactivos, mentres que o segundo é un composto activo único purificado.Non obstante, a diversidade e complexidade dos ingredientes activos naturais con diferentes mecanismos de acción poden mellorar a actividade biolóxica ou dificultar o desenvolvemento da resistencia nas poboacións hóspedes [55, 56, 57].Moitos investigadores informaron do potencial anti-mosquitos de C. verum, A. galanga e C. rotundus e os seus compoñentes como β-bisaboleno, cinamaldehído e 1,8-cineol [22, 36, 58, 59, 60,61, 62,63,64].Non obstante, unha revisión da literatura revelou que non houbo informes previos sobre o seu efecto sinérxico coa permetrina ou outros insecticidas sintéticos contra os mosquitos Aedes.Aedes aegypti.
Neste estudo, observáronse diferenzas significativas na susceptibilidade á permetrina entre as dúas cepas de Aedes.Aedes aegypti.MCM-S é sensible á permetrina, mentres que PMD-R é moito menos sensible a ela, cunha taxa de resistencia de 8,41.En comparación coa sensibilidade do MCM-S, a PMD-R é menos sensible á permetrina pero máis sensible á EO, o que proporciona unha base para estudos posteriores destinados a aumentar a eficacia da permetrina combinándoa con EO.Un bioensaio sinérxico baseado en combinacións para efectos en adultos mostrou que as mesturas binarias de EO e permetrina reducían ou aumentaban a mortalidade dos Aedes adultos.Aedes aegypti.A adición de aceite de C. verum diminuíu lixeiramente a LD50 da permetrina fronte a MCM-S pero aumentou lixeiramente a LD50 fronte a PMD-R con valores de SR de 1,05 e 0,96, respectivamente.Isto indica que o aceite de C. verum non ten un efecto sinérxico ou antagónico sobre a permetrina cando se proba en MCM-S e PMD-R.Pola contra, os aceites de C. rotundus e A. galanga mostraron un efecto sinérxico significativo ao reducir significativamente os valores de LD50 da permetrina en MCM-S ou PMD-R.Cando se combinou permetrina con EO de C. rotundus e A. galanga, os valores SR da mestura de EO-permetrina para MCM-S foron 6,28 e 4,00, respectivamente.Ademais, cando se avaliou a permetrina fronte a PMD-R en combinación con C. rotundus (SR = 8,81) ou A. galanga (SR = 1233,33), os valores de SR aumentaron significativamente.Cómpre sinalar que tanto C. rotundus como A. galanga melloraron a toxicidade da permetrina fronte a PMD-R Ae.aegypti significativamente.Do mesmo xeito, descubriuse que o PBO aumenta a toxicidade da permetrina con valores de SR de 1,69 e 5,69 para as cepas MCM-S e PMD-R, respectivamente.Dado que C. rotundus e A. galanga tiñan os valores de SR máis altos, consideráronse os mellores sinerxistas para mellorar a toxicidade da permetrina en MCM-S e PMD-R, respectivamente.
Varios estudos anteriores informaron do efecto sinérxico das combinacións de insecticidas sintéticos e extractos de plantas contra varias especies de mosquitos.Un bioensaio larvicida contra Anopheles Stephensi estudado por Kalayanasundaram e Das [65] mostrou que o fentión, un organofosfato de amplo espectro, estaba asociado con Cleodendron inerme, Pedalium murax e Parthenium hysterophorus.Observouse unha sinerxía significativa entre os extractos cun efecto sinérxico (SF) de 1,31., 1,38, 1,40, 1,48, 1,61 e 2,23, respectivamente.Nun cribado larvicida de 15 especies de mangle, o extracto de éter de petróleo de raíces de mangle foi o máis efectivo contra Culex quinquefasciatus cun valor de CL50 de 25,7 mg/L [66].Tamén se informou do efecto sinérxico deste extracto e do insecticida botánico piretro para reducir a CL50 do piretro contra as larvas de C. quinquefasciatus de 0,132 mg/L a 0,107 mg/L, ademais, neste estudo utilizouse un cálculo SF de 1,23.34,35,44].Avaliouse a eficacia combinada do extracto de raíz de cidra de Solanum e de varios insecticidas sintéticos (por exemplo, fentión, cipermetrina (un piretroide sintético) e timethphos (un larvicida organofosforado)) contra os mosquitos anopheles.Stephensi [54] e C. quinquefasciatus [34].O uso combinado de cipermetrina e extracto de éter de petróleo de froitas amarelas mostrou un efecto sinérxico sobre a cipermetrina en todas as proporcións.A relación máis efectiva foi a combinación binaria 1:1 con valores de LC50 e SF de 0,0054 ppm e 6,83, respectivamente, en relación con An.Stephen West[54].Mentres que unha mestura binaria 1:1 de S. xanthocarpum e temephos era antagónica (SF = 0,6406), a combinación S. xanthocarpum-fenthion (1:1) mostrou actividade sinérxica contra C. quinquefasciatus cun SF de 1,3125 [34].Tong e Blomquist [35] estudaron os efectos do óxido de etileno vexetal sobre a toxicidade do carbarilo (un carbamato de amplo espectro) e da permetrina para os mosquitos Aedes.Aedes aegypti.Os resultados mostraron que o óxido de etileno de agar, pementa negra, enebro, helichrysum, sándalo e sésamo aumentou a toxicidade do carbarilo para os mosquitos Aedes.aegypti os valores SR de larvas varían de 1,0 a 7,0.En cambio, ningún dos EO era tóxico para os mosquitos Aedes adultos.Neste momento, non se informaron efectos sinérxicos para a combinación de Aedes aegypti e EO-carbaryl.O PBO utilizouse como control positivo para mellorar a toxicidade do carbarilo contra os mosquitos Aedes.Os valores de SR das larvas e dos adultos de Aedes aegypti son 4,9-9,5 e 2,3, respectivamente.Só se probou a actividade larvicida en mesturas binarias de permetrina e EO ou PBO.A mestura de EO-permetrina tivo un efecto antagónico, mentres que a mestura de PBO-permetrina tivo un efecto sinérxico contra os mosquitos Aedes.Larvas de Aedes aegypti.Non obstante, aínda non se realizaron experimentos de resposta á dose e avaliación de SR para mesturas de PBO-permetrina.Aínda que se conseguiron poucos resultados en canto aos efectos sinérxicos das combinacións fitosintéticas fronte aos mosquitos vectores, estes datos avalan os resultados existentes, que abren a perspectiva de engadir sinerxistas non só para reducir a dose aplicada, senón tamén para aumentar o efecto mata.Eficiencia dos insectos.Ademais, os resultados deste estudo demostraron por primeira vez que os aceites de C. rotundus e A. galanga exercen sinérxicamente unha eficacia significativamente maior contra cepas de mosquitos Aedes susceptibles aos piretroides e resistentes aos piretroides en comparación co PBO cando se combinan coa toxicidade da permetrina.Aedes aegypti.Non obstante, resultados inesperados da análise sinérxica mostraron que o aceite de C. verum tiña a maior actividade anti-adulto contra ambas as cepas de Aedes.Sorprendentemente, o efecto tóxico da permetrina sobre Aedes aegypti foi insatisfactorio.As variacións dos efectos tóxicos e dos efectos sinérxicos poden deberse en parte á exposición a diferentes tipos e niveis de compoñentes bioactivos destes aceites.
A pesar dos esforzos por comprender como mellorar a eficiencia, os mecanismos sinérxicos seguen sen estar claros.As posibles razóns para a diferente eficacia e potencial sinérxico poden incluír diferenzas na composición química dos produtos probados e diferenzas na susceptibilidade dos mosquitos asociadas co estado de resistencia e desenvolvemento.Hai diferenzas entre os compoñentes principais e secundarios de óxido de etileno probados neste estudo, e demostrouse que algúns destes compostos teñen efectos repelentes e tóxicos contra unha variedade de pragas e vectores de enfermidades [61,62,64,67,68].Non obstante, os principais compostos caracterizados nos aceites de C. rotundus, A. galanga e C. verum, como cypern, β-bisaboleno e cinamaldehído, non foron probados neste traballo polas súas actividades anti-adultos e sinérxicas contra Ae, respectivamente.Aedes aegypti.Polo tanto, son necesarios estudos futuros para illar os ingredientes activos presentes en cada aceite esencial e dilucidar a súa eficacia insecticida e as interaccións sinérxicas contra este mosquito vector.En xeral, a actividade insecticida depende da acción e reacción entre os velenos e os tecidos dos insectos, que se poden simplificar e dividir en tres etapas: penetración na pel do corpo do insecto e nas membranas do órgano obxectivo, activación (= interacción co obxectivo) e desintoxicación.substancias tóxicas [57, 69].Polo tanto, a sinerxía de insecticidas que produce unha maior eficacia das combinacións de tóxicos require polo menos unha destas categorías, como unha maior penetración, unha maior activación dos compostos acumulados ou unha menor desintoxicación do ingrediente activo do pesticida.Por exemplo, a tolerancia á enerxía atrasa a penetración da cutícula a través dunha cutícula engrosada e a resistencia bioquímica, como o metabolismo mellorado dos insecticidas observado nalgunhas cepas de insectos resistentes [70, 71].A significativa eficacia dos EO para aumentar a toxicidade da permetrina, especialmente contra PMD-R, pode indicar unha solución ao problema da resistencia aos insecticidas ao interactuar cos mecanismos de resistencia [57, 69, 70, 71].Tong e Blomquist [35] apoiaron os resultados deste estudo demostrando unha interacción sinérxica entre os OE e os pesticidas sintéticos.aegypti, hai evidencias de actividade inhibitoria contra encimas desintoxicantes, incluídas as monooxixenases e carboxilesterases do citocromo P450, que están estreitamente asociadas co desenvolvemento da resistencia aos pesticidas tradicionais.Non só se di que o PBO é un inhibidor metabólico da monooxixenase do citocromo P450, senón que tamén mellora a penetración dos insecticidas, como demostra o seu uso como control positivo en estudos sinérxicos [35, 72].Curiosamente, o 1,8-cineol, un dos compoñentes importantes que se atopan no aceite de galanga, é coñecido polos seus efectos tóxicos sobre especies de insectos [22, 63, 73] e ten efectos sinérxicos en varias áreas de investigación da actividade biolóxica [22, 63, 73]. 74]..,75,76,77].Ademais, o 1,8-cineol en combinación con varias drogas, incluíndo curcumina [78], 5-fluorouracilo [79], ácido mefenámico [80] e zidovudina [81] tamén ten un efecto de promoción da permeación.in vitro.Así, o posible papel do 1,8-cineol na acción insecticida sinérxica non é só como ingrediente activo senón tamén como potenciador da penetración.Debido a unha maior sinerxía coa permetrina, especialmente contra a PMD-R, os efectos sinérxicos do aceite de galanga e o aceite de trichosantes observados neste estudo poden resultar de interaccións con mecanismos de resistencia, é dicir, unha maior permeabilidade ao cloro.Os piretroides aumentan a activación dos compostos acumulados e inhiben encimas desintoxicantes como as monooxixenases e carboxilesterases do citocromo P450.Non obstante, estes aspectos requiren máis estudos para dilucidar o papel específico do OE e os seus compostos illados (solo ou en combinación) nos mecanismos sinérxicos.
En 1977, reportáronse niveis crecentes de resistencia á permetrina nas principais poboacións de vectores en Tailandia, e durante as décadas seguintes, o uso da permetrina foi substituído en gran medida por outros produtos químicos piretroides, especialmente aqueles substituídos por deltametrina [82].Non obstante, a resistencia do vector á deltametrina e outras clases de insecticidas é moi común en todo o país debido ao uso excesivo e persistente [14, 17, 83, 84, 85, 86].Para combater este problema, recoméndase rotar ou reutilizar pesticidas descartados que antes eran efectivos e menos tóxicos para os mamíferos, como a permetrina.Actualmente, aínda que o uso da permetrina reduciuse nos últimos programas de control de mosquitos do goberno nacional, aínda se pode atopar resistencia á permetrina nas poboacións de mosquitos.Isto pode deberse á exposición dos mosquitos a produtos comerciais de control de pragas domésticos, que consisten principalmente en permetrina e outros piretroides [14, 17].Así, a reutilización exitosa da permetrina require o desenvolvemento e implementación de estratexias para reducir a resistencia do vector.Aínda que ningún dos aceites esenciais probados individualmente neste estudo foi tan eficaz como a permetrina, traballar xunto coa permetrina deu como resultado efectos sinérxicos impresionantes.Esta é unha indicación prometedora de que a interacción do EO con mecanismos de resistencia resulta en que a combinación de permetrina con EO sexa máis eficaz que o insecticida ou o EO só, particularmente contra PMD-R Ae.Aedes aegypti.Os beneficios das mesturas sinérxicas para aumentar a eficacia, a pesar do uso de doses máis baixas para o control de vectores, poden levar a unha mellora da xestión da resistencia e a redución de custos [33, 87].A partir destes resultados, é agradable observar que os OE de A. galanga e C. rotundus foron significativamente máis efectivos que o PBO para sinerxizar a toxicidade da permetrina tanto en cepas MCM-S como en PMD-R e son unha alternativa potencial ás axudas ergoxénicas tradicionais.
Os EO seleccionados tiveron efectos sinérxicos significativos na mellora da toxicidade dos adultos contra PMD-R Ae.aegypti, especialmente o aceite de galanga, ten un valor SR de ata 1233,33, o que indica que EO ten unha ampla promesa como sinerxista para mellorar a eficacia da permetrina.Isto pode estimular o uso dun novo produto natural activo, que en conxunto podería aumentar o uso de produtos de control de mosquitos altamente eficaces.Tamén revela o potencial do óxido de etileno como sinerxista alternativo para mellorar eficazmente os insecticidas máis antigos ou tradicionais para abordar os problemas de resistencia existentes nas poboacións de mosquitos.O uso de plantas facilmente dispoñibles nos programas de control de mosquitos non só reduce a dependencia dos materiais importados e caros, senón que tamén estimula os esforzos locais para fortalecer os sistemas de saúde pública.
Estes resultados mostran claramente o significativo efecto sinérxico producido pola combinación de óxido de etileno e permetrina.Os resultados destacan o potencial do óxido de etileno como sinerxista vexetal no control dos mosquitos, aumentando a eficacia da permetrina contra os mosquitos, especialmente en poboacións resistentes.Os futuros desenvolvementos e investigacións requirirán bioanálise sinérxica dos aceites de galangal e alpinia e os seus compostos illados, combinacións de insecticidas de orixe natural ou sintética contra múltiples especies e etapas de mosquitos e probas de toxicidade contra organismos non obxectivo.Uso práctico do óxido de etileno como sinerxista alternativa viable.
Organización Mundial da Saúde.Estratexia global de prevención e control do dengue 2012-2020.Xenebra: Organización Mundial da Saúde, 2012.
Weaver SC, Costa F., Garcia-Blanco MA, Ko AI, Ribeiro GS, Saade G., et al.Virus Zika: historia, aparición, bioloxía e perspectivas de control.Investigación antiviral.2016;130:69–80.
Organización Mundial da Saúde.Ficha informativa do dengue.2016. http://www.searo.who.int/entity/vector_borne_tropical_diseases/data/data_factsheet/en/.Data de acceso: 20 de xaneiro de 2017
Consellería de Saúde Pública.Estado actual dos casos de dengue e febre hemorráxica do dengue en Tailandia.2016. http://www.m-society.go.th/article_attach/13996/17856.pdf.Data de acceso: 6 de xaneiro de 2017
Ooi EE, Goh CT, Gabler DJ.35 anos de prevención do dengue e control de vectores en Singapur.Enfermidade infecciosa súbita.2006;12:887–93.
Morrison AC, Zielinski-Gutierrez E, Scott TW, Rosenberg R. Identificar retos e propor solucións para controlar os vectores virais de Aedes aegypti.PLOS Medicina.2008;5:362–6.
Centros para o Control e Prevención de Enfermidades.Dengue, entomoloxía e ecoloxía.2016. http://www.cdc.gov/dengue/entomologyecology/.Data de acceso: 6 de xaneiro de 2017
Ohimain EI, Angaye TKN, Bassey SE Comparación da actividade larvicida de follas, casca, talos e raíces de Jatropa curcas (Euphorbiaceae) contra o vector da malaria Anopheles gambiae.SZhBR.2014;3:29-32.
Soleimani-Ahmadi M, Watandoust H, Zareh M. Características do hábitat das larvas de Anopheles en áreas de malaria do programa de erradicación da malaria no sueste de Irán.Asia Pacífico J Trop Biomed.2014;4(Suppl 1):S73–80.
Bellini R, Zeller H, Van Bortel W. Revisión de enfoques para o control de vectores, prevención e control dos brotes de virus do Nilo Occidental e os desafíos que enfronta Europa.Vector de parasitos.2014;7:323.
Muthusamy R., Shivakumar MS Selección e mecanismos moleculares da resistencia á cipermetrina en eirugas vermellas (Amsacta albistriga Walker).Fisioloxía bioquímica das pragas.2014;117:54–61.
Ramkumar G., Shivakumar MS Estudo de laboratorio da resistencia á permetrina e a resistencia cruzada de Culex quinquefasciatus a outros insecticidas.Centro de Investigación Palastor.2015;114:2553–60.
Matsunaka S, Hutson DH, Murphy SD.Química dos pesticidas: benestar humano e medio ambiente, vol.3: Mecanismo de acción, metabolismo e toxicoloxía.Nova York: Pergamon Press, 1983.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Souvonkert V, Kongmi M, Korbel AV, Ngoen-Klan R. Unha revisión da resistencia aos insecticidas e a evitación do comportamento dos vectores de enfermidades humanas en Tailandia.Vector de parasitos.2013;6:280.
Chareonviriyaphap T, Aum-Aung B, Ratanatham S. Patróns actuais de resistencia a insecticidas entre os vectores de mosquitos en Tailandia.Sueste asiático J Trop Med Saúde Pública.1999;30:184-94.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Ratanatham S. Estado da malaria en Tailandia.Sueste asiático J Trop Med Saúde Pública.2000;31:225–37.
Plernsub S, Saingamsuk J, Yanola J, Lumjuan N, Thippavankosol P, Walton S, Somboon P. Frecuencia temporal de mutacións de resistencia á caída de F1534C e V1016G en mosquitos Aedes aegypti en Chiang Mai, Tailandia, e o impacto das mutacións na eficiencia da néboa térmica. que conteñen piretroides.Aktatrop.2016;162:125–32.
Vontas J, Kioulos E, Pavlidi N, Moru E, Della Torre A, Ranson H. Insecticide resistance in the main dengue vectors Aedes albopictus and Aedes aegypti.Fisioloxía bioquímica das pragas.2012;104:126–31.
Hora de publicación: 08-Xul-2024