Realizáronse unha serie de ensaios piloto en cabanas en Khowe, no sur de Benin, para avaliar a eficacia biolóxica de mosquiteras de nova xeración novas e probadas no campo contra os vectores da malaria resistentes á piretrina. As redes de campo foron retiradas dos fogares despois de 12, 24 e 36 meses. Analizáronse pezas web cortadas de ITN enteiras para determinar a composición química e realizáronse bioensaios de susceptibilidade durante cada ensaio para avaliar os cambios na resistencia aos insecticidas na poboación de vectores Khowe.
Interceptor® G2 superou a outros ITN, confirmando a superioridade das redes de piretroides e clorfenapir sobre outros tipos de redes. Entre os novos produtos, todas as ITN de próxima xeración demostraron unha mellor bioeficacia que Interceptor®; con todo, a magnitude desta mellora reduciuse despois do envellecemento do campo debido á menor durabilidade dos compostos non piretroides. Estes resultados destacan a necesidade de mellorar a persistencia insecticida das MTI de próxima xeración.
InsecticidaAs mosquiteras tratadas (MTI) xogaron un papel fundamental na redución da morbilidade e mortalidade por malaria nos últimos 20 anos. Desde 2004, distribuíronse máis de 3.000 millóns de MTI en todo o mundo e os estudos de modelización suxiren que o 68% dos casos de malaria en África subsahariana foron evitados entre 2000 e 2015. Desafortunadamente, a resistencia das poboacións de vectores de malaria aos piretroides (a clase estándar de insecticidas que se usan nas MTI) aumentou significativamente, ameazando a eficacia desta intervención esencial. Ao mesmo tempo, o progreso no control da malaria diminuíu a nivel mundial, e varios países con alta carga experimentaron un aumento dos casos de malaria desde 2015. Estas tendencias impulsaron o desenvolvemento dunha nova xeración de produtos innovadores ITN destinados a facer fronte á ameaza da resistencia aos piretroides e axudar a reducir esta carga e acadar obxectivos globais ambiciosos .
Actualmente existen no mercado tres ITN de nova xeración, cada unha combinando un piretroide con outro insecticida ou sinerxista capaz de superar a resistencia dos piretroides en vectores da malaria. Nos últimos anos, realizáronse unha serie de ensaios controlados aleatorios (ECA) en cluster para avaliar a eficacia epidemiolóxica destas redes en comparación coas redes estándar só con piretroides e proporcionar a evidencia necesaria para apoiar as recomendacións da Organización Mundial da Saúde (OMS). Os mosquiteros que combinan piretroides con butóxido de piperonilo (PBO), un sinerxista que mellora a eficacia dos piretroides ao inhibir as encimas de desintoxicación dos mosquitos, foron os primeiros en ser recomendados pola OMS despois de que dous produtos (Olyset® Plus e PermaNet® 3.0) demostraran un impacto epidemiolóxico superior en comparación con mosquiteros controlados aleatoriamente en clúster. Tanzania e Uganda. Non obstante, son necesarios máis datos para determinar o valor para a saúde pública das mosquiteras de piretroides-PBO en África occidental, onde a resistencia severa aos piretroides pode reducir os seus beneficios en comparación coas mosquiteras só de piretroides.
A persistencia insecticida das MTI normalmente avalíase recollendo periódicamente redes das comunidades e probándoas en bioensaios de laboratorio utilizando cepas de mosquitos criados con insectos. Aínda que estes ensaios son útiles para caracterizar a biodisponibilidade e a eficacia dos insecticidas na superficie das redes de cama ao longo do tempo, proporcionan información limitada sobre a eficacia comparativa dos diferentes tipos de redes de cama de próxima xeración porque os métodos e cepas de mosquitos utilizados deben adaptarse ao modo de acción dos insecticidas que conteñen. A proba experimental de cabanas é un enfoque alternativo que se pode usar para avaliar comparativamente a eficacia das redes tratadas con insecticida nos estudos de durabilidade en condicións que imitan as interaccións naturais entre os hóspedes dos mosquitos salvaxes e as redes domésticas durante o seu uso. De feito, estudos recentes de modelización que empregan substitutos entomolóxicos para datos epidemiolóxicos demostraron que a mortalidade dos mosquitos e as taxas de alimentación medidas nestes ensaios poden usarse para predecir o impacto das MTI na incidencia e prevalencia da malaria nos ECA en conglomerados. Así, os ensaios experimentais baseados en cabanas nos que se inclúen ganglios linfáticos tratados con insecticida recollidos en campo en ECA en cluster poden proporcionar datos valiosos sobre a bioeficacia comparativa e a persistencia do insecticida dos ganglios tratados con insecticida durante a súa vida útil esperada, e axudar a interpretar os resultados epidemiolóxicos destes estudos.
A proba experimental de cabanas é unha simulación de habitación humana normalizada recomendada pola Organización Mundial da Saúde para avaliar a eficacia das mosquiteras tratadas con insecticidas. Estas probas replican as condicións de exposición do mundo real que atopan os hóspedes de mosquitos cando interactúan coas redes domésticas e, polo tanto, son un enfoque moi apropiado para avaliar a eficacia biolóxica das redes de cama usadas durante a súa vida útil prevista.
Este estudo avaliou a eficacia entomolóxica de tres tipos diferentes de mosquiteras insecticidas de nova xeración (PermaNet® 3.0, Royal Guard® e Interceptor® G2) en condicións de campo en hórreos experimentais e comparounos cunha rede estándar só de piretrina (Interceptor®). Todas estas mosquiteras tratadas con insecticida están incluídas na lista de precualificacións da OMS para o control de vectores. A continuación ofrécense as características detalladas de cada mosquitera:
En marzo de 2020, levouse a cabo unha campaña de distribución a gran escala de mosquiteras de campo en aldeas de cabanas da prefectura de Zou, ao sur de Benín, para probas piloto en casetas. Seleccionáronse as mosquiteras Interceptor®, Royal Guard® e Interceptor® G2 de grupos seleccionados aleatoriamente nos municipios de Kove, Zagnanado e Ouinhi como parte dun estudo observacional de durabilidade aniñado nun ECA de cluster para avaliar a eficacia epidemiolóxica das mosquiteras dobres tratadas con insecticida. As mosquiteras PermaNet® 3.0 recolléronse na aldea de Avokanzun preto dos concellos de Jija e Bohicon (7°20′ N, 1°56′ E) e distribuíronse simultáneamente coas mosquiteras RCT durante a campaña masiva de 2020 do Programa Nacional de Control da Malaria. A figura 1 mostra as localizacións dos grupos/aldeas de estudo onde se recolleron os diferentes tipos de ITN en relación aos sitios de cabanas experimentais.
Realizouse un ensaio piloto en cabanas para comparar o rendemento entomolóxico dos ITN Interceptor®, PermaNet® 3.0, Royal Guard® e Interceptor® G2 cando se retiraban dos fogares aos 12, 24 e 36 meses despois da difusión. En cada momento anual, o rendemento das MTI envellecidas no campo comparouse con redes novas sen usar de cada tipo e redes sen tratar como control negativo. En cada momento anual, probáronse un total de 54 mostras réplicas de ITN en idade de campo e 6 novas ITN de cada tipo en 1 ou 2 probas de cabanas con rotación diaria de tratamentos. Antes de cada proba en cabana, mediuse o índice de porosidade medio das redes de campo envellecidas de cada tipo de ITN segundo as recomendacións da OMS. Para simular o desgaste do uso diario, todas as MTI novas e as redes de control sen tratar foron perforadas con seis orificios de 4 x 4 cm: dous en cada panel lateral longo e un en cada panel lateral curto, de acordo coas recomendacións da OMS. A mosquitera instalouse no interior da caseta atando os bordos das láminas do tellado con cordas a cravos nos ángulos superiores dos muros da caseta. En cada proba de cabana avaliáronse os seguintes tratamentos:
As redes envellecidas no campo avaliáronse en casetas experimentais no mesmo ano en que se retiraron as redes. Os ensaios en cabanas realizáronse no mesmo lugar de maio a setembro de 2021, de abril a xuño de 2022 e de maio a xullo de 2023, retirándose as redes despois de 12, 24 e 36 meses, respectivamente. Cada ensaio durou un ciclo completo de tratamento (54 noites durante 9 semanas), excepto durante 12 meses, cando se realizaron dous ciclos de tratamento consecutivos para aumentar o tamaño da mostra de mosquitos. Seguindo un deseño de cadrado latino, os tratamentos foron rotados semanalmente entre cabanas experimentais para controlar os efectos da localización das casetas, mentres que os voluntarios foron rotados diariamente para controlar as diferenzas no atractivo dos mosquitos dos hóspedes individuais. Os mosquitos recolléronse 6 días por semana; o día 7, antes do seguinte ciclo de rotación, limpáronse e ventiláronse as casetas para evitar a infestación.
Os principais criterios de eficacia para o tratamento experimental de cabanas contra mosquitos Anopheles gambiae resistentes aos piretroides e a comparación da ITN de próxima xeración coa rede Interceptor® só para piretroides foron:
Os criterios de valoración secundarios de eficacia para o tratamento experimental de cabanas contra os mosquitos Anopheles gambiae resistentes aos piretroides foron os seguintes:
Contención (%): redución da taxa de entrada no grupo tratado en comparación co grupo non tratado. O cálculo é o seguinte:
onde Tu é o número de mosquitos incluídos no grupo control non tratado e Tt é o número de mosquitos incluídos no grupo tratado.
Taxa de abandono (%): taxa de abandono debido á posible irritación do tratamento, expresada como proporción de mosquitos recollidos no balcón.
. O coeficiente de supresión (%) é a redución da proporción de mosquitos chupadores de sangue no grupo tratado en comparación co grupo control non tratado. O método de cálculo é o seguinte: onde Bfu é a proporción de mosquitos chupadores de sangue no grupo control non tratado e Bft é a proporción de mosquitos chupadores de sangue do grupo tratado.
Redución da fertilidade (%) - a redución da proporción de mosquitos fértiles no grupo tratado en comparación co control non tratado. O método de cálculo é o seguinte: onde Fu é a proporción de mosquitos fértiles no grupo control non tratado e Ft é a proporción de mosquitos fértiles no grupo tratado.
Para supervisar os cambios no perfil de resistencia das poboacións de vectores Covè ao longo do tempo, a OMS realizou bioensaios in vitro e en frascos o mesmo ano de cada ensaio experimental en cabanas (2021, 2022, 2023) para avaliar a susceptibilidade á IA nas MTI en estudo e para informar a interpretación dos resultados. Nos estudos in vitro, os mosquitos foron expostos a papeis de filtro tratados con concentracións definidas de alfa-cipermetrina (0,05 %) e deltametrina (0,05 %), e a botellas recubertas con concentracións definidas de CFP (100 μg/botella) e PPF (100 μg/botella) para valorar a susceptibilidade destes insecticidas. A intensidade da resistencia aos piretroides investigouse expoñendo os mosquitos a concentracións diferenciais de 5 veces (0,25%) e 10 veces (0,50%) de α-cipermetrina e deltametrina. Finalmente, a contribución da sinerxía PBO e a sobreexpresión do citocromo P450 monooxixenase (P450) á resistencia aos piretroides foi avaliada mediante a exposición previa de mosquitos a concentracións diferenciais de α-cipermetrina (0,05%) e deltametrina (0,05%) e preexposición a PBO (4%). O papel de filtro usado para a proba do tubo da OMS foi adquirido da Universiti Sains Malaysia. Os frascos de proba de bioensaio da OMS utilizando CFP e PPF preparáronse segundo as recomendacións da OMS .
Os mosquitos utilizados para os bioensaios foron recollidos na fase larvaria de lugares de cría preto das cabanas experimentais e despois criados a adultos. En cada momento, polo menos 100 mosquitos foron expostos a cada tratamento durante 60 min, con 4 réplicas por tubo/botella e aproximadamente 25 mosquitos por tubo/botella. Para as exposicións a piretroides e CFP, utilizáronse mosquitos de 3-5 días non alimentados, mentres que para PPF, mosquitos chupadores de sangue de 5-7 días foron utilizados para estimular a ovoxénese e avaliar o efecto da PPF na reprodución dos mosquitos. As exposicións paralelas realizáronse usando papel de filtro impregnado de aceite de silicona, PBO puro (4%) e botellas recubertas de acetona como controis. Ao final da exposición, os mosquitos foron trasladados a recipientes sen tratar e expostos a algodón empapado en solución de glicosa ao 10% (p/v). A mortalidade rexistrouse 24 horas despois da exposición aos piretroides e cada 24 horas durante 72 horas despois da exposición a CFP e PPF. Para avaliar a susceptibilidade ao PPF, diseccionáronse os mosquitos expostos ao PPF e os controis negativos correspondentes despois de rexistrarse a mortalidade atrasada, observouse o desenvolvemento do ovario mediante un microscopio composto e avaliouse a fertilidade segundo o estadio de desenvolvemento do ovo de Christophers [28, 30]. Se os ovos se desenvolveron completamente ata o estadio V de Christopher, os mosquitos clasificáronse como fértiles, e se os ovos non estaban completamente desenvolvidos e permaneceron nos estadios I-IV, os mosquitos clasificáronse como estériles.
En cada momento do ano, cortáronse pezas de 30 × 30 cm de redes novas e envellecidas no campo nos lugares especificados nas recomendacións da OMS [22]. Despois do corte, as redes rotuláronse, envolvéronse en papel de aluminio e gardáronse nun frigorífico a 4 ± 2 °C para evitar a migración da IA ao tecido. Despois, as redes foron enviadas ao Centro de Investigación Agrícola de Valón en Bélxica para a súa análise química para medir os cambios no contido total de IA durante a súa vida útil. Os métodos analíticos utilizados (baseados nos métodos recomendados polo Comité Cooperativo Internacional para a Análise de Pesticidas) foron descritos anteriormente [25, 31].
Para os datos dos ensaios experimentais en cabanas, sumáronse os números totais de mosquitos vivos/mortos, picadores/non picantes e fértiles/estériles nos diferentes compartimentos da cabana para cada tratamento en cada ensaio para calcular os distintos resultados proporcionais (mortalidade de 72 horas, picadura, ectoparasitismo, atrapamento neto, fertilidade) e o seu intervalo de confianza correspondente (IC95 %). As diferenzas entre tratamentos para estes resultados binarios proporcionais analizáronse mediante regresión loxística, mentres que as diferenzas para os resultados de reconto foron analizadas mediante regresión binomial negativa. Debido a que se realizaron dous ciclos de rotación de tratamentos cada 12 meses e algúns tratamentos foron probados en ensaios, as análises de penetración de mosquitos axustáronse ao número de días en que se probou cada tratamento. Tamén se analizou a nova ITN para cada resultado para obter unha única estimación para todos os puntos de tempo. Ademais da principal variable explicativa do tratamento, cada modelo incluíu cabana, dorme, período de proba, índice de apertura ITN e día como efectos fixos para controlar a variación debido ás diferenzas no atractivo individual de dormentes e cabanas, estacionalidade, estado das mosquiteras e exceso de dispersión. As análises de regresión produciron cocientes de probabilidades axustados (OR) e os correspondentes intervalos de confianza do 95 % para estimar o efecto da ITN de nova xeración en comparación coa rede só de piretroides, Interceptor®, nos resultados primarios da mortalidade e fecundidade dos mosquitos. Os valores P dos modelos tamén se utilizaron para asignar letras compactas que indican a significación estatística a un nivel do 5% para todas as comparacións por parellas dos resultados primarios e secundarios. Todas as análises de regresión realizáronse na versión 18 de Stata.
A susceptibilidade das poboacións de vectores Covese interpretouse en función da mortalidade e fecundidade observadas in vitro e dos bioensaios en botella segundo as recomendacións da Organización Mundial da Saúde . Os resultados da análise química proporcionaron o contido total de AI nos fragmentos de ITN, que se utilizou para calcular a taxa de retención de AI nas redes envellecidas en campo en comparación coas novas redes en cada momento cada ano. Todos os datos rexistráronse manualmente en formularios estandarizados e despois introducíronse dúas veces nunha base de datos de Microsoft Excel.
Os Comités de Ética do Ministerio de Saúde de Benín (núm. 6/30/MS/DC/DRFMT/CNERS/SA), a London School of Hygiene & Tropical Medicine (LSHTM) (núm. 16237) e a Organización Mundial da Saúde (núm. ERC.0003153) aprobaron a realización dunha cabana piloto na que participan voluntarios. Obtívose o consentimento informado por escrito de todos os voluntarios antes da participación no estudo. Todos os voluntarios recibiron quimioprofilaxis gratuíta para reducir o risco de malaria, e unha enfermeira estivo de garda durante todo o ensaio para avaliar calquera voluntario que presentase síntomas de febre ou unha reacción adversa ao produto da proba.
Os resultados completos das cabanas experimentais, que resumen o número total de mosquitos vivos/mortos, famélicos/alimentados con sangue e fértiles/estériles para cada grupo experimental, así como as estatísticas descritivas preséntanse como material complementario (táboa S1).
Nunha cabana experimental en Kowa, Benín, suprimiuse a alimentación de sangue dos mosquitos salvaxes Anopheles gambiae resistentes aos piretroides. Os datos de controis non tratados e redes novas reuníronse entre os ensaios para proporcionar unha única estimación da eficacia. Mediante a análise de regresión loxística, as columnas con letras comúns non foron significativamente diferentes ao nivel do 5% (p > 0,05). As barras de erro representan intervalos de confianza do 95%.
Mortalidade de mosquitos salvaxes Anopheles gambiae resistentes aos piretroides que entran nunha cabana experimental en Kowa, Benín. Os datos de controis non tratados e redes novas reuníronse entre os ensaios para proporcionar unha única estimación da eficacia. Mediante a análise de regresión loxística, as columnas con letras comúns non foron significativamente diferentes ao nivel do 5% (p > 0,05). As barras de erro representan intervalos de confianza do 95%.
O odds ratio describe a diferenza de mortalidade coas mosquiteras de nova xeración en comparación coas mosquiteras só con piretroides. A liña de puntos representa un odds ratio de 1, o que indica que non hai diferenzas na mortalidade. Un odds ratio > 1 indica unha maior mortalidade coas mosquiteras de nova xeración. Os datos das mosquiteras de nova xeración reuníronse entre os ensaios para producir unha única estimación da eficacia. As barras de erro representan intervalos de confianza do 95%.
Aínda que Interceptor® demostrou a mortalidade máis baixa de todas as ITN probadas, o envellecemento no campo non afectou negativamente o seu impacto na mortalidade dos vectores. De feito, o novo Interceptor® provocou unha mortalidade do 12%, mentres que as redes de campo mostraron unha lixeira mellora aos 12 meses (17%, p=0,006) e aos 24 meses (17%, p=0,004), antes de volver a niveis similares ás novas redes aos 36 meses (11%, p=0,05). Pola contra, as taxas de mortalidade para a seguinte xeración de redes tratadas con insecticida diminuíron gradualmente co paso do tempo despois da implantación. A redución foi máis pronunciada con Interceptor® G2, onde a mortalidade diminuíu do 58% coas novas mallas ao 36% aos 12 meses (p.< 0,001), 31 % aos 24 meses (p< 0,001), e 20% aos 36 meses (p< 0,001). O novo PermaNet® 3.0 resultou nunha redución da mortalidade ata o 37%, que tamén diminuíu significativamente ata o 20% aos 12 meses (p.< 0,001), 16 % aos 24 meses (p< 0,001), e 18% aos 36 meses (p< 0,001). Unha tendencia similar observouse coa Royal Guard®, coa nova malla que resultou nunha redución do 33% da mortalidade, seguida dunha redución significativa ata o 21% aos 12 meses (p.< 0,001), 17 % aos 24 meses (p< 0,001) e 15% aos 36 meses (p< 0,001).
Redución da fecundidade dos mosquitos salvaxes Anopheles gambiae resistentes aos piretroides que entran nunha cabana experimental en Kwa, Benín. Os datos de controis non tratados e redes novas reuníronse entre os ensaios para proporcionar unha única estimación da eficacia. As barras con letras comúns non foron significativamente diferentes ao nivel do 5% (p > 0,05) pola análise de regresión loxística. As barras de erro representan intervalos de confianza do 95%.
Os odds ratios describen a diferenza de fertilidade coas mosquiteras de nova xeración en comparación coas mosquiteras só con piretroides. A liña de puntos representa unha proporción de 1, o que indica que non hai diferenzas na fertilidade. Odds ratios< 1 indican unha maior redución da fertilidade coas redes de nova xeración. Os datos das mosquiteras de nova xeración reuníronse entre os ensaios para producir unha única estimación da eficacia. As barras de erro representan intervalos de confianza do 95%.
Hora de publicación: 17-feb-2025