Grazas por visitar Nature.com.A versión do navegador que estás a usar ten soporte CSS limitado.Para obter os mellores resultados, recomendámosche que utilices unha versión máis recente do teu navegador (ou que desactives o modo de compatibilidade en Internet Explorer).Mentres tanto, para garantir a asistencia continua, mostramos o sitio sen estilo nin JavaScript.
As combinacións de compostos insecticidas derivados de plantas poden presentar interaccións sinérxicas ou antagónicas contra as pragas.Dada a rápida propagación das enfermidades transmitidas polos mosquitos Aedes e a crecente resistencia das poboacións de mosquitos Aedes aos insecticidas tradicionais, formuláronse vinte e oito combinacións de compostos terpénicos a base de aceites esenciais vexetais e probáronse contra as fases larvaria e adulta de Aedes aegypti.Inicialmente avaliáronse cinco aceites esenciais vexetais (EO) pola súa eficacia larvicida e de uso en adultos, e identificáronse dous compostos principais en cada OE en función dos resultados de GC-MS.Adquiráronse os principais compostos identificados, a saber, disulfuro de dialilo, trisulfuro de dialilo, carvona, limoneno, eugenol, metil eugenol, eucaliptol, eudesmol e mosquito alfa-pineno.Despois preparáronse combinacións binarias destes compostos utilizando doses subletais e probáronse e determináronse os seus efectos sinérxicos e antagónicos.As mellores composicións larvicidas obtéñense mesturando limoneno con disulfuro de dialilo, e as mellores composicións adulticidas obtéñense mesturando carvona con limoneno.O larvicida sintético utilizado comercialmente Temphos e o medicamento para adultos Malathion foron probados por separado e en combinacións binarias con terpenoides.Os resultados mostraron que a combinación de temefos e disulfuro de dialilo e malatión e eudesmol foi a combinación máis eficaz.Estas potentes combinacións teñen potencial para o seu uso contra Aedes aegypti.
Os aceites esenciais vexetais (EO) son metabolitos secundarios que conteñen varios compostos bioactivos e están a ser cada vez máis importantes como alternativa aos pesticidas sintéticos.Non só son ecolóxicos e amigables para o usuario, senón que tamén son unha mestura de diferentes compostos bioactivos, o que tamén reduce a probabilidade de desenvolver resistencia a medicamentos1.Usando a tecnoloxía GC-MS, os investigadores examinaron os compoñentes de varios aceites esenciais vexetais e identificaron máis de 3.000 compostos de 17.500 plantas aromáticas2, a maioría dos cales foron probados para determinar as súas propiedades insecticidas e, segundo se informa, teñen efectos insecticidas3,4.Algúns estudos destacan que a toxicidade do compoñente principal do composto é igual ou maior que a do seu óxido de etileno bruto.Pero o uso de compostos individuais pode deixar de novo espazo para o desenvolvemento de resistencias, como é o caso dos insecticidas químicos5,6.Polo tanto, o foco actual está na preparación de mesturas de compostos a base de óxido de etileno para mellorar a eficacia insecticida e reducir a probabilidade de resistencia nas poboacións de pragas obxectivo.Os compostos activos individuais presentes nos OE poden presentar efectos sinérxicos ou antagónicos en combinacións que reflicten a actividade global do OE, un feito que foi ben enfatizado en estudos realizados por investigadores anteriores7,8.O programa de control vectorial tamén inclúe EO e os seus compoñentes.A actividade mosquitocida dos aceites esenciais foi amplamente estudada nos mosquitos Culex e Anopheles.Varios estudos intentaron desenvolver pesticidas eficaces combinando varias plantas con pesticidas sintéticos usados comercialmente para aumentar a toxicidade global e minimizar os efectos secundarios9.Pero os estudos deste tipo de compostos contra Aedes aegypti seguen sendo raros.Os avances da ciencia médica e o desenvolvemento de fármacos e vacinas axudaron a combater algunhas enfermidades transmitidas por vectores.Pero a presenza de diferentes serotipos do virus, transmitidos polo mosquito Aedes aegypti, provocou o fracaso dos programas de vacinación.Polo tanto, cando se producen tales enfermidades, os programas de control de vectores son a única opción para evitar a propagación da enfermidade.No escenario actual, o control do Aedes aegypti é moi importante xa que é un vector clave de varios virus e dos seus serotipos causantes do dengue, do Zika, do dengue hemorráxico, da febre amarela, etc. O máis destacable é o feito de que o número de os casos de case todas as enfermidades transmitidas por Aedes transmitidas por vectores aumentan cada ano en Exipto e aumentan en todo o mundo.Polo tanto, neste contexto, é urxente desenvolver medidas de control eficaces e respectuosas co medio ambiente para as poboacións de Aedes aegypti.Os candidatos potenciais a este respecto son os EO, os seus compostos constituíntes e as súas combinacións.Polo tanto, este estudo intentou identificar combinacións sinérxicas eficaces de compostos clave de EO vexetais de cinco plantas con propiedades insecticidas (é dicir, menta, albahaca santa, Eucalyptus spotted, Allium sulfur e melaleuca) contra Aedes aegypti.
Todos os EO seleccionados demostraron unha actividade larvicida potencial contra Aedes aegypti cunha CL50 de 24 h que varía de 0,42 a 163,65 ppm.A actividade larvicida máis alta rexistrouse para a menta (Mp) EO cun valor de CL50 de 0,42 ppm ás 24 h, seguido do allo (As) cun valor de CL50 de 16,19 ppm ás 24 h (táboa 1).
Con excepción de Ocimum Sainttum, Os EO, os outros catro EO examinados mostraron efectos alercidas obvios, con valores de CL50 que oscilaban entre 23,37 e 120,16 ppm durante o período de exposición de 24 horas.Thymophilus striata (Cl) EO foi máis eficaz para matar adultos cun valor de CL50 de 23,37 ppm dentro das 24 horas posteriores á exposición, seguido de Eucalyptus maculata (Em) que tiña un valor de CL50 de 101,91 ppm (táboa 1).Por outra banda, o valor de LC50 para Os aínda non se determinou xa que a taxa de mortalidade máis alta do 53% rexistrouse coa dose máis alta (Figura complementaria 3).
Identificáronse e seleccionáronse os dous principais compostos constituíntes de cada EO en función dos resultados da base de datos da biblioteca NIST, a porcentaxe de área do cromatograma GC e os resultados do espectro MS (táboa 2).Para EO As, os principais compostos identificados foron o disulfuro de dialilo e o trisulfuro de dialilo;para EO Mp os principais compostos identificados foron carvona e limoneno, para EO Em os principais compostos identificados foron eudesmol e eucaliptol;Para EO Os, os principais compostos identificados foron eugenol e metil eugenol, e para EO Cl, os principais compostos identificados foron eugenol e α-pineno (Figura 1, Figuras complementarias 5-8, Táboa complementaria 1-5).
Resultados da espectrometría de masas dos principais terpenoides de aceites esenciais seleccionados (disulfuro de A-dialilo; trisulfuro de B-dialilo; C-eugenol; D-metileugenol; E-limoneno; ceperona F-aromática; G-α-pineno; H-cineol). ; R-eudamol).
Un total de nove compostos (disulfuro de dialilo, trisulfuro de dialilo, eugenol, metil eugenol, carvona, limoneno, eucaliptol, eudesmol, α-pineno) foron identificados como compostos efectivos que son os principais compoñentes do EO e foron ensaiados individualmente contra Aedes aegypti na larva. etapas..O composto eudesmol tivo a actividade larvicida máis alta cun valor de CL50 de 2,25 ppm despois de 24 horas de exposición.Tamén se atopou que os compostos disulfuro de dialilo e trisulfuro de dialilo teñen potenciais efectos larvicidas, con doses subletais medias no intervalo de 10-20 ppm.De novo observouse actividade larvicida moderada para os compostos eugenol, limoneno e eucaliptol con valores de CL50 de 63,35 ppm, 139,29 ppm.e 181,33 ppm despois de 24 horas, respectivamente (táboa 3).Non obstante, non se atopou un potencial larvicida significativo de metil eugenol e carvona mesmo nas doses máis altas, polo que non se calcularon os valores de LC50 (táboa 3).O larvicida sintético Temephos tivo unha concentración letal media de 0,43 ppm contra Aedes aegypti durante 24 horas de exposición (táboa 3, táboa complementaria 6).
Identificáronse sete compostos (disulfuro de dialilo, trisulfuro de dialilo, eucaliptol, α-pineno, eudesmol, limoneno e carvona) como os principais compostos de EO eficaz e probáronse individualmente contra os mosquitos Aedes exipcios adultos.Segundo a análise de regresión de Probit, descubriuse que Eudesmol tiña o maior potencial cun valor de CL50 de 1,82 ppm, seguido de Eucalyptol cun valor de CL50 de 17,60 ppm nun tempo de exposición de 24 horas.Os cinco compostos restantes probados foron moderadamente prexudiciais para os adultos con CL50 que oscilaban entre 140,79 e 737,01 ppm (táboa 3).O malatión organofosforado sintético foi menos potente que o eudesmol e superior aos outros seis compostos, cun valor de CL50 de 5,44 ppm durante o período de exposición de 24 horas (táboa 3, táboa complementaria 6).
Seleccionáronse sete potentes compostos de chumbo e o tamefosato de organofosforados para formular combinacións binarias das súas doses de CL50 nunha proporción 1:1.Preparáronse e probouse un total de 28 combinacións binarias para determinar a súa eficacia larvicida contra Aedes aegypti.Atopáronse nove combinacións sinérxicas, 14 combinacións antagónicas e cinco combinacións non larvicidas.Entre as combinacións sinérxicas, a combinación de disulfuro de dialilo e temofol foi a máis efectiva, cunha mortalidade do 100% observada despois de 24 horas (táboa 4).Do mesmo xeito, as mesturas de limoneno con disulfuro de dialilo e eugenol con timetfos mostraron un bo potencial cunha mortalidade larvaria observada do 98,3% (táboa 5).As 4 combinacións restantes, a saber, eudesmol máis eucaliptol, eudesmol máis limoneno, eucaliptol máis alfa-pineno, alfa-pineno máis temefos, tamén mostraron unha eficacia larvicida significativa, con taxas de mortalidade observadas superiores ao 90%.A taxa de mortalidade esperada está preto do 60-75%.(Táboa 4).Non obstante, a combinación de limoneno con α-pineno ou eucalipto mostrou reaccións antagónicas.Así mesmo, comprobouse que mesturas de Temephos con eugenol ou eucalipto ou eudesmol ou trisulfuro de dialilo teñen efectos antagónicos.Así mesmo, a combinación de disulfuro de dialilo e trisulfuro de dialilo e a combinación de calquera destes compostos con eudesmol ou eugenol son antagónicas na súa acción larvicida.Tamén se informou de antagonismo coa combinación de eudesmol con eugenol ou α-pineno.
De todas as 28 mesturas binarias probadas para a actividade ácida de adultos, 7 combinacións foron sinérxicas, 6 non tiveron efecto e 15 foron antagónicas.As mesturas de eudesmol con eucalipto e limoneno con carvona resultaron máis eficaces que outras combinacións sinérxicas, con taxas de mortalidade ás 24 horas do 76 % e do 100 %, respectivamente (táboa 5).Observouse que o malatión presenta un efecto sinérxico con todas as combinacións de compostos excepto o limoneno e o trisulfuro de dialilo.Por outra banda, atopouse antagonismo entre o disulfuro de dialilo e o trisulfuro de dialilo e a combinación de calquera deles con eucalipto, ou eucaliptol, ou carvona ou limoneno.Do mesmo xeito, as combinacións de α-pineno con eudesmol ou limoneno, eucaliptol con carvona ou limoneno e limoneno con eudesmol ou malatión mostraron efectos larvicidas antagónicos.Para as seis combinacións restantes, non houbo diferenzas significativas entre a mortalidade esperada e a observada (táboa 5).
En función dos efectos sinérxicos e doses subletais, a súa toxicidade larvicida contra un gran número de mosquitos Aedes aegypti foi finalmente seleccionada e probada.Os resultados mostraron que a mortalidade larvaria observada usando as combinacións binarias eugenol-limoneno, disulfuro de dialilo-limoneno e disulfuro de dialilo-timefos foi do 100%, mentres que a mortalidade larvaria esperada foi do 76,48%, 72,16% e 63,4%, respectivamente (táboa 6)..A combinación de limoneno e eudesmol foi relativamente menos eficaz, cunha mortalidade larvaria do 88% observada durante o período de exposición de 24 horas (táboa 6).En resumo, as catro combinacións binarias seleccionadas tamén demostraron efectos larvicidas sinérxicos contra Aedes aegypti cando se aplicaron a gran escala (táboa 6).
Seleccionáronse tres combinacións sinérxicas para o bioensaio adultocida para controlar grandes poboacións de Aedes aegypti adulto.Para seleccionar combinacións para probar en grandes colonias de insectos, primeiro centrámonos nas dúas mellores combinacións sinérxicas de terpenos, é dicir, carvona máis limoneno e eucaliptol máis eudesmol.En segundo lugar, seleccionouse a mellor combinación sinérxica entre a combinación de malatión de organofosforados sintéticos e terpenoides.Cremos que a combinación de malatión e eudesmol é a mellor combinación para probar en grandes colonias de insectos debido á maior mortalidade observada e aos valores moi baixos de CL50 dos ingredientes candidatos.O malatión presenta sinerxismo en combinación con α-pineno, disulfuro de dialilo, eucalipto, carvona e eudesmol.Pero se observamos os valores de LC50, Eudesmol ten o valor máis baixo (2,25 ppm).Os valores calculados de LC50 de malatión, α-pineno, disulfuro de dialilo, eucaliptol e carvona foron 5,4, 716,55, 166,02, 17,6 e 140,79 ppm.respectivamente.Estes valores indican que a combinación de malatión e eudesmol é a combinación óptima en termos de dosificación.Os resultados mostraron que as combinacións de carvona máis limoneno e eudesmol máis malatión tiveron un 100% de mortalidade observada en comparación cunha mortalidade esperada do 61% ao 65%.Outra combinación, eudesmol máis eucaliptol, mostrou unha taxa de mortalidade do 78,66% despois de 24 horas de exposición, fronte a unha taxa de mortalidade esperada do 60%.As tres combinacións seleccionadas demostraron efectos sinérxicos mesmo cando se aplicaron a gran escala contra o Aedes aegypti adulto (táboa 6).
Neste estudo, EO de plantas seleccionadas como Mp, As, Os, Em e Cl mostraron efectos letais prometedores nas fases larvarias e adultas de Aedes aegypti.O Mp EO tivo a actividade larvicida máis alta cun valor de CL50 de 0,42 ppm, seguido dos EO As, Os e Em cun valor de CL50 inferior a 50 ppm despois de 24 h.Estes resultados son consistentes cos estudos previos de mosquitos e outras moscas dípteras10,11,12,13,14.Aínda que a potencia larvicida do Cl é menor que outros aceites esenciais, cun valor de CL50 de 163,65 ppm despois de 24 horas, o seu potencial adulto é o máis alto cun valor de CL50 de 23,37 ppm despois de 24 horas.Os EO Mp, As e Em tamén mostraron un bo potencial alercida con valores de CL50 no intervalo de 100-120 ppm ás 24 h de exposición, pero foron relativamente inferiores á súa eficacia larvicida.Por outra banda, EO Os demostrou un efecto alercida insignificante mesmo coa maior dose terapéutica.Así, os resultados indican que a toxicidade do óxido de etileno para as plantas pode variar dependendo da fase de desenvolvemento dos mosquitos15.Tamén depende da taxa de penetración dos OE no corpo do insecto, da súa interacción con encimas diana específicos e da capacidade de desintoxicación do mosquito en cada fase de desenvolvemento16.Un gran número de estudos demostraron que o composto principal compoñente é un factor importante na actividade biolóxica do óxido de etileno, xa que representa a maioría dos compostos totais3,12,17,18.Polo tanto, consideramos dous compostos principais en cada EO.Segundo os resultados da GC-MS, identificáronse o disulfuro de dialilo e o trisulfuro de dialilo como os principais compostos de EO As, o que é consistente cos informes anteriores19,20,21.Aínda que informes anteriores indicaban que o mentol era un dos seus principais compostos, a carvona e o limoneno foron identificados de novo como os principais compostos de Mp EO22,23.O perfil de composición de Os EO mostrou que o eugenol e o metil eugenol son os principais compostos, o que é similar aos descubrimentos de investigadores anteriores16,24.O eucaliptol e o eucaliptol foron os principais compostos presentes no aceite de folla de Em, o que é consistente cos descubrimentos dalgúns investigadores25,26 pero en contra dos descubrimentos de Olalade et al.27.O predominio do cineol e do α-pineno observouse no aceite esencial de melaleuca, que é similar aos estudos anteriores28,29.Relacionáronse e tamén neste estudo observáronse diferenzas intraespecíficas na composición e concentración dos aceites esenciais extraídos da mesma especie vexetal en diferentes lugares, que están influenciadas polas condicións xeográficas de crecemento das plantas, o tempo de colleita, o estadio de desenvolvemento ou a idade da planta.aparición de quimiotipos, etc.22,30,31,32.Os compostos clave identificados foron despois comprados e probados polos seus efectos larvicidas e efectos sobre os mosquitos adultos Aedes aegypti.Os resultados mostraron que a actividade larvicida do disulfuro de dialilo era comparable á do EO As bruto.Pero a actividade do trisulfuro de dialilo é maior que o EO As.Estes resultados son similares aos obtidos por Kimbaris et al.33 en Culex filipinas.Non obstante, estes dous compostos non mostraron unha boa actividade autocida contra os mosquitos obxectivo, o que é consistente cos resultados de Plata-Rueda et al 34 sobre Tenebrio molitor.Os EO é eficaz contra o estadio larvario de Aedes aegypti, pero non contra o estadio adulto.Estableceuse que a actividade larvicida dos principais compostos individuais é menor que a do Os EO bruto.Isto implica un papel para outros compostos e as súas interaccións no óxido de etileno bruto.O metil eugenol só ten unha actividade insignificante, mentres que o eugenol só ten unha actividade larvicida moderada.Esta conclusión confirma, por unha banda,35,36 e, por outra banda, contradí as conclusións dos investigadores anteriores37,38.As diferenzas nos grupos funcionais do eugenol e do metileugenol poden producir diferentes toxicidades para o mesmo insecto obxectivo39.Atopouse que o limoneno tiña unha actividade larvicida moderada, mentres que o efecto da carvona era insignificante.Do mesmo xeito, a toxicidade relativamente baixa do limoneno para insectos adultos e a alta toxicidade da carvona apoian os resultados dalgúns estudos anteriores40 pero contradín outros41.A presenza de dobres enlaces tanto en posicións intracíclicas como exocíclicas pode aumentar os beneficios destes compostos como larvicidas3,41, mentres que a carvona, que é unha cetona con carbonos alfa e beta insaturados, pode presentar un maior potencial de toxicidade en adultos42.Non obstante, as características individuais do limoneno e da carvona son moito máis baixas que o total de EO Mp (táboa 1, táboa 3).Entre os terpenoides probados, descubriuse que o eudesmol tiña a maior actividade larvicida e de adultos cun valor de CL50 inferior a 2,5 ppm, polo que é un composto prometedor para o control dos mosquitos Aedes.O seu rendemento é mellor que o de todo o EO Em, aínda que isto non é consistente cos achados de Cheng et al.40.O eudesmol é un sesquiterpeno con dúas unidades de isopreno que é menos volátil que os monoterpenos osixenados como o eucalipto e, polo tanto, ten un maior potencial como pesticida.O eucaliptol ten unha actividade adulta maior que a larvicida, e os resultados de estudos anteriores avalan e refutan isto37,43,44.A actividade por si soa é case comparable á de todo o EO Cl.Outro monoterpeno bicíclico, o α-pineno, ten menos efecto adulto sobre Aedes aegypti que un efecto larvicida, que é o contrario do efecto do EO Cl completo.A actividade insecticida global dos terpenoides está influenciada pola súa lipofilia, volatilidade, ramificación do carbono, área de proxección, superficie, grupos funcionais e as súas posicións45,46.Estes compostos poden actuar destruíndo acumulacións celulares, bloqueando a actividade respiratoria, interrompendo a transmisión dos impulsos nerviosos, etc. 47 Atopouse que o organofosforado sintético Temephos tiña a actividade larvicida máis alta cun valor CL50 de 0,43 ppm, o que é consistente cos datos de Lek. Utala48.A actividade dos adultos do malatión organofosforado sintético foi de 5,44 ppm.Aínda que estes dous organofosforados mostraron respostas favorables contra cepas de laboratorio de Aedes aegypti, a resistencia dos mosquitos a estes compostos informouse en diferentes partes do mundo49.Non obstante, non se atoparon informes similares sobre o desenvolvemento da resistencia aos medicamentos a base de plantas50.Así, os produtos botánicos considéranse como alternativas potenciais aos pesticidas químicos nos programas de control de vectores.
Probouse o efecto larvicida en 28 combinacións binarias (1:1) preparadas a partir de terpenoides potentes e terpenoides con timetfos, e atopouse que 9 combinacións eran sinérxicas, 14 antagónicas e 5 antagónicas.Sen efecto.Por outra banda, no bioensaio de potencia para adultos, 7 combinacións foron sinérxicas, 15 combinacións eran antagónicas e 6 combinacións non tiñan ningún efecto.A razón pola que certas combinacións producen un efecto sinérxico pode deberse a que os compostos candidatos interactúan simultaneamente en diferentes vías importantes, ou á inhibición secuencial de diferentes encimas clave dunha determinada vía biolóxica51.A combinación de limoneno con disulfuro de dialilo, eucalipto ou eugenol atopouse como sinérxica en aplicacións a pequena e grande escala (táboa 6), mentres que a súa combinación con eucalipto ou α-pineno ten efectos antagónicos sobre as larvas.De media, o limoneno parece ser un bo sinerxista, posiblemente debido á presenza de grupos metilo, unha boa penetración no estrato córneo e un mecanismo de acción diferente52,53.Previamente informouse de que o limoneno pode causar efectos tóxicos ao penetrar nas cutículas dos insectos (toxicidade de contacto), afectar ao sistema dixestivo (antialimentario) ou ao sistema respiratorio (actividade de fumigación), 54 mentres que os fenilpropanoides como o eugenol poden afectar os encimas metabólicos 55. Polo tanto, as combinacións de compostos con diferentes mecanismos de acción poden aumentar o efecto letal global da mestura.Atopouse que o eucaliptol era sinérxico co disulfuro de dialilo, o eucalipto ou o α-pineno, pero outras combinacións con outros compostos eran non larvicidas ou antagónicas.Os primeiros estudos demostraron que o eucaliptol ten actividade inhibitoria sobre a acetilcolinesterase (AChE), así como sobre os receptores de octaamina e GABA56.Dado que os monoterpenos cíclicos, eucaliptol, eugenol, etc. poden ter o mesmo mecanismo de acción que a súa actividade neurotóxica 57 , minimizando así os seus efectos combinados mediante a inhibición mutua.Así mesmo, a combinación de Temephos con disulfuro de dialilo, α-pineno e limoneno resultou sinérxica, apoiando informes previos sobre un efecto sinérxico entre produtos a base de plantas e organofosforados sintéticos58.
Descubriuse que a combinación de eudesmol e eucaliptol ten un efecto sinérxico nos estadios larvario e adulto de Aedes aegypti, posiblemente debido aos seus diferentes modos de acción debido ás súas diferentes estruturas químicas.O eudesmol (un sesquiterpeno) pode afectar ao sistema respiratorio 59 e o eucaliptol (un monoterpeno) pode afectar á acetilcolinesterase 60 .A exposición conjunta dos ingredientes a dous ou máis sitios obxectivo pode mellorar o efecto letal global da combinación.En bioensaios de substancias adultas, descubriuse que o malatión era sinérxico coa carvona ou eucaliptol ou eucaliptol ou disulfuro de dialilo ou α-pineno, o que indica que é sinérxico coa adición de limoneno e di.Bos candidatos alérxicos sinérxicos para toda a carteira de compostos terpénicos, con excepción do trisulfuro de alilo.Thangam e Kathiresan61 tamén informaron de resultados similares sobre o efecto sinérxico do malatión con extractos de herbas.Esta resposta sinérxica pode deberse aos efectos tóxicos combinados do malatión e dos fitoquímicos sobre as encimas desintoxicantes de insectos.Os organofosfatos como o malatión actúan xeralmente inhibindo as esterases e monooxixenases do citocromo P45062,63,64.Polo tanto, combinar o malatión con estes mecanismos de acción e os terpenos con diferentes mecanismos de acción pode mellorar o efecto letal xeral sobre os mosquitos.
Por outra banda, o antagonismo indica que os compostos seleccionados son menos activos en combinación que cada composto só.A razón do antagonismo nalgunhas combinacións pode ser que un composto modifica o comportamento do outro modificando a taxa de absorción, distribución, metabolismo ou excreción.Os primeiros investigadores consideraron que esta era a causa do antagonismo nas combinacións de fármacos.Moléculas Posible mecanismo 65. Do mesmo xeito, as posibles causas do antagonismo poden estar relacionadas con mecanismos de acción similares, competencia de compostos constituíntes polo mesmo receptor ou sitio diana.Nalgúns casos, tamén se pode producir inhibición non competitiva da proteína diana.Neste estudo, dous compostos organosulfurados, o disulfuro de dialilo e o trisulfuro de dialilo, mostraron efectos antagónicos, posiblemente debido á competencia polo mesmo sitio obxectivo.Así mesmo, estes dous compostos de xofre mostraron efectos antagónicos e non tiveron efecto cando se combinaron con eudesmol e α-pineno.O eudesmol e o alfa-pineno son de natureza cíclica, mentres que o disulfuro de dialilo e o trisulfuro de dialilo son de natureza alifática.En función da estrutura química, a combinación destes compostos debería aumentar a actividade letal global xa que os seus sitios diana adoitan ser diferentes34,47, pero experimentalmente atopamos antagonismo, que pode deberse ao papel destes compostos nalgúns organismos descoñecidos in vivo.sistemas como resultado da interacción.Do mesmo xeito, a combinación de cineol e α-pineno produciu respostas antagónicas, aínda que os investigadores informaron previamente de que os dous compostos teñen diferentes obxectivos de acción47,60.Dado que ambos compostos son monoterpenos cíclicos, pode haber algúns sitios diana comúns que poidan competir pola unión e influír na toxicidade global dos pares combinatorios estudados.
En función dos valores de CL50 e da mortalidade observada, seleccionáronse as dúas mellores combinacións sinérxicas de terpenos, a saber, os pares de carvona + limoneno e eucaliptol + eudesmol, así como o malatión organofosforado sintético con terpenos.A combinación sinérxica óptima de compostos de malatión + Eudesmol probouse nun bioensaio de insecticida para adultos.Apunta a grandes colonias de insectos para confirmar se estas combinacións eficaces poden funcionar contra un gran número de individuos en espazos de exposición relativamente grandes.Todas estas combinacións demostran un efecto sinérxico contra grandes enxames de insectos.Obtivéronse resultados similares para unha combinación larvicida sinérxica óptima probada contra grandes poboacións de larvas de Aedes aegypti.Así, pódese dicir que a combinación sinérxica larvicida e adulticida eficaz dos compostos de EO vexetais é un forte candidato contra os produtos químicos sintéticos existentes e pode usarse aínda máis para controlar as poboacións de Aedes aegypti.Así mesmo, tamén se poden utilizar combinacións eficaces de larvicidas ou adulticidas sintéticos con terpenos para reducir as doses de timetfos ou malatión administradas aos mosquitos.Estas potentes combinacións sinérxicas poden proporcionar solucións para futuros estudos sobre a evolución da resistencia aos medicamentos nos mosquitos Aedes.
Os ovos de Aedes aegypti foron recollidos do Centro de Investigación Médica Rexional, Dibrugarh, Consello Indio de Investigación Médica e mantivéronse a temperatura controlada (28 ± 1 °C) e humidade (85 ± 5%) no Departamento de Zooloxía da Universidade de Gauhati baixo o seguintes condicións: Describíronse Arivoli et al.Despois da eclosión, as larvas foron alimentadas con alimentos para larvas (po de galletas de can e levadura nunha proporción de 3:1) e os adultos foron alimentados cunha solución de glicosa ao 10%.A partir do terceiro día despois da emerxencia, permitíuselles ás femias adultas chupar o sangue das ratas albinas.Molla o papel de filtro en auga nun vaso e colócao na gaiola para a posta de ovos.
Mostras de plantas seleccionadas: follas de eucalipto (Myrtaceae), albahaca santa (Lamiaceae), menta (Lamiaceae), melaleuca (Myrtaceae) e bulbos de allium (Amaryllidaceae).Recollido de Guwahati e identificado polo Departamento de Botánica da Universidade de Gauhati.As mostras de plantas recollidas (500 g) foron sometidas a hidrodestilación mediante un aparello Clevenger durante 6 horas.O EO extraído foi recollido en frascos de vidro limpo e almacenado a 4 ° C para estudo posterior.
A toxicidade larvicida estudouse mediante procedementos estándar lixeiramente modificados da Organización Mundial da Saúde 67 .Use DMSO como emulsionante.Cada concentración de EO probouse inicialmente a 100 e 1000 ppm, expoñendo 20 larvas en cada réplica.En función dos resultados, aplicouse un intervalo de concentración e rexistrouse a mortalidade de 1 hora a 6 horas (en intervalos de 1 hora) e ás 24 horas, 48 horas e 72 horas despois do tratamento.As concentracións subletais (CL50) determináronse despois de 24, 48 e 72 horas de exposición.Cada concentración foi ensaiada por triplicado xunto cun control negativo (só auga) e un control positivo (auga tratada con DMSO).Se se produce pupación e morre máis do 10% das larvas do grupo control, repítese o experimento.Se a taxa de mortalidade no grupo control está entre o 5-10%, use a fórmula de corrección de Abbott 68.
O método descrito por Ramar et al.69 utilizouse para un bioensaio de adultos contra Aedes aegypti usando acetona como disolvente.Cada EO probouse inicialmente contra mosquitos adultos Aedes aegypti a concentracións de 100 e 1000 ppm.Aplique 2 ml de cada solución preparada ao número Whatman.1 papel de filtro (tamaño 12 x 15 cm2) e deixar evaporar a acetona durante 10 minutos.Como control utilizouse papel de filtro tratado con só 2 ml de acetona.Despois de que a acetona se evapore, o papel de filtro tratado e o papel de filtro de control colócanse nun tubo cilíndrico (10 cm de profundidade).Dez mosquitos que non se alimentaban de sangue de 3 a 4 días foron transferidos a triplicado de cada concentración.A partir dos resultados das probas preliminares, probáronse varias concentracións de aceites seleccionados.A mortalidade rexistrouse 1 hora, 2 horas, 3 horas, 4 horas, 5 horas, 6 horas, 24 horas, 48 horas e 72 horas despois da liberación do mosquito.Calcule os valores de CL50 para tempos de exposición de 24 horas, 48 horas e 72 horas.Se a taxa de mortalidade do lote control supera o 20%, repita a proba enteira.Así mesmo, se a taxa de mortalidade no grupo control é superior ao 5%, axustar os resultados das mostras tratadas mediante a fórmula de Abbott68.
Realizáronse cromatografía de gases (Agilent 7890A) e espectrometría de masas (Accu TOF GCv, Jeol) para analizar os compostos constituíntes dos aceites esenciais seleccionados.O GC estaba equipado cun detector FID e unha columna capilar (HP5-MS).O gas portador era helio, o caudal era de 1 ml/min.O programa GC establece Allium sativum en 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M e Ocimum Sainttum en 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 - 280, para menta 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, para eucalipto 20,60-1M-10-200-3M-30-280, e para tinto Para mil capas son elas. 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M.
Identificáronse os principais compostos de cada EO en función da porcentaxe de área calculada a partir dos resultados do cromatograma GC e da espectrometría de masas (referenciados á base de datos de estándares NIST 70).
Os dous compostos principais de cada EO foron seleccionados en función dos resultados da GC-MS e comprados a Sigma-Aldrich cunha pureza do 98-99 % para outros bioensaios.Probáronse os compostos para a súa eficacia larvicida e para adultos contra Aedes aegypti como se describe anteriormente.Analizáronse os larvicidas sintéticos máis utilizados, o tamefosato (Sigma Aldrich) e o fármaco adulto malatión (Sigma Aldrich) para comparar a súa eficacia con compostos EO seleccionados, seguindo o mesmo procedemento.
Preparáronse mesturas binarias de compostos terpénicos seleccionados e compostos terpénicos máis organofosfatos comerciais (tilefos e malatión) mesturando a dose de CL50 de cada composto candidato nunha proporción 1:1.As combinacións preparadas foron probadas en estadios larvarios e adultos de Aedes aegypti como se describe anteriormente.Cada bioensaio realizouse por triplicado para cada combinación e por triplicado para os compostos individuais presentes en cada combinación.A morte dos insectos obxectivo rexistrouse despois de 24 horas.Calcula a taxa de mortalidade esperada para unha mestura binaria mediante a seguinte fórmula.
onde E = taxa de mortalidade esperada dos mosquitos Aedes aegypti en resposta a unha combinación binaria, é dicir, conexión (A + B).
O efecto de cada mestura binaria foi etiquetado como sinérxico, antagónico ou ningún efecto en función do valor χ2 calculado polo método descrito por Pavla52.Calcula o valor de χ2 para cada combinación utilizando a seguinte fórmula.
O efecto dunha combinación definiuse como sinérxico cando o valor de χ2 calculado era maior que o valor da táboa para os correspondentes graos de liberdade (intervalo de confianza do 95%) e se se atopou que a mortalidade observada superaba a mortalidade esperada.Do mesmo xeito, se o valor de χ2 calculado para calquera combinación supera o valor da táboa con algúns graos de liberdade, pero a mortalidade observada é menor que a esperada, o tratamento considérase antagónico.E se nalgunha combinación o valor calculado de χ2 é menor que o valor da táboa nos correspondentes graos de liberdade, considérase que a combinación non ten efecto.
Seleccionáronse de tres a catro combinacións potencialmente sinérxicas (100 larvas e 50 de actividade de insectos larvicidas e adultos) para probar contra un gran número de insectos.Adultos) proceda como se indica arriba.Xunto coas mesturas, os compostos individuais presentes nas mesturas seleccionadas tamén foron probados en igual número de larvas de Aedes aegypti e adultos.A relación de combinación é unha parte de dose CL50 dun composto candidato e parte de dose CL50 do outro composto constituínte.No bioensaio de actividade de adultos, os compostos seleccionados foron disoltos no disolvente acetona e aplicáronse a papel de filtro envolto nun recipiente de plástico cilíndrico de 1300 cm3.A acetona evaporouse durante 10 minutos e os adultos foron liberados.Do mesmo xeito, no bioensaio larvicida, disolvéronse primeiro doses de compostos candidatos LC50 en volumes iguais de DMSO e despois mesturáronse con 1 litro de auga almacenada en recipientes de plástico de 1300 cc, e as larvas foron liberadas.
Realizouse a análise probabilística de 71 datos de mortalidade rexistrados mediante SPSS (versión 16) e o software Minitab para calcular os valores de LC50.
Hora de publicación: 01-07-2024